H2S含量检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义:
H²S 是一种新型气态信号分子,存在于脑内的神经递质,生理浓度的 H²S 对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用,并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。
测定原理:
H²S 与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝,亚甲基蓝在 665nm 处有最大吸收峰,通过测定其吸光值可计算 H²S 含量。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 32mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 16mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体 16mL×1 瓶,4℃保存。
试剂五:液体 2.5mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品处理:
1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1 :5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g ,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、细菌、真菌:按照细胞数量(10⁴ 个):提取液体积(mL)为 500~1000 :1 的比例(建议500 万细胞加入 1mL提取液), 冰浴超声波破碎细胞(功率 300w ,超声 3 秒, 间隔 7 秒,总时间 3min); 然后10000g ,4℃ , 离心10min,取上清置于冰上待测。
3、血清(浆):直接测定
操作表:(取 2 mL 离心管,按照下表操作):
空白管
测定管
样本(μL)
600
H²O (μL)
试剂一 (μL)
充分震荡混匀
试剂二(μL)
10000g ,4℃, 离心 10min,去上清,留沉淀
300
试剂三(μL)
试剂四(μL)
10000g ,4℃, 离心 10min ,取 800μL 上清加入 1mL 玻璃比色皿
试剂五(μL)
40
混匀,25℃静置 5min ,测定 665nm 吸光值,记为 A 测定和 A 空白,ΔA=A 测定-A 空白。
H²S 计算公式: