1、血清(浆)POD活性
单位定义:每mL血清(浆)在每mL反应体系中每分钟A470变化0.01为一个酶活力单位。
计算公式:
POD(U/mL)=ΔA×V反总÷V样÷0.01÷T=2000×ΔA
2、组织、细菌或细胞POD活性
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白在每mL反应体系中每分钟A470变化0.01为一个酶活力单位。 POD(U/mg prot)=ΔA×V反总÷
(V样×Cpr)÷0.01÷T =2000×ΔA÷Cpr
(2) 按样本鲜重计算
单位定义:每g组织在每mL反应体系中每分钟A470变化0.01为一个酶活力单位。POD(U/g鲜重)=ΔA×V反总÷(W×
V样÷V样总)÷0.01÷T =2000×ΔA÷W
(3) 按细菌或细胞密度计算
单位定义:每1万个细菌或细胞在每mL反应体系中每分钟A470变化0.01为一个酶活力单位。POD(U/10⁴cell)=ΔA×V
反总÷(500×V样÷V样总)÷0.01÷T =4×ΔAV反总:反应体系总体积,0.2mL;V样:加入样本体积,0.01mL;V样总:加入
提取液体积,1mL;T:反应时间,1min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量;500:细菌或细胞总数,500万。
用96孔板测定的计算公式如下
1、血清(浆)POD活性
单位定义:每mL血清(浆)在每mL反应体系中每分钟A470变化0.005为一个酶活力单位。POD(U/mL)=ΔA×V反总÷V
样÷0.005÷T =4000×ΔA
2、组织、细菌或细胞POD活性
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白在每mL反应体系中每分钟A470变化0.005为一个酶活力单位。 POD(U/mg prot)=ΔA×V
反总÷(V样×Cpr)÷0.005÷T =4000×ΔA÷Cpr
(3) 按样本鲜重计算
单位定义:每g组织在每mL反应体系中每分钟A470变化0.005为一个酶活力单位。 POD(U/g鲜重)=ΔA×V反总÷(W×
V样÷V样总)÷0.005÷T=4000×ΔA÷W
(4) 按细菌或细胞密度计算
单位定义:每1万个细菌或细胞在每mL反应体系中每分钟A470变化0.005为一个酶活力单位。 POD(U/10⁴cell)=ΔA×V反
总÷(500×V样÷V样总)÷0.005÷T =8×ΔAV反总:反应体系总体积,0.2mL; V样:加入样本体积,0.01mL;V样总:加入
提取液体积,1 mL;T:反应时间,1min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量;500:细菌或细胞总数,500万。