血清低密度脂蛋白(LDL-C)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义:
低密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,与冠心病的发生和动脉粥样硬化损伤呈正相关,是脂类疾病分类和风险预测的一个重要指标。
测定原理:
用沉淀剂分离血清中的低密度脂蛋白胆固醇,利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸,从而把胆固醇酯转化为 FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-胆甾烯酮和 H₂O₂ ;再利用过氧化物酶催化 H₂O₂ 氧化 4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在 500nm 有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品:
离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 10 mL× 1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 40 mL × 1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,-20℃保存。临用前加 15mL 试剂四充分溶解。
试剂四:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
标准品:液体 1mL×1 支,4℃保存。
样品处理:
取血后 3 小时内分离血清,将血清样品与试剂一按照 2:1 的比例充分混匀,25℃静置 15min ,2000g离心15min,上清置于冰上待测。
测定操作表:
空白管
标准管
测定管
蒸馏水(μL)
20
标准品(μL)
样本(μL)
试剂二
750
试剂三(μL)
250
混匀,37℃静置30min ,于 1mL 玻璃比色皿,空白管调零,测定 500nm 处吸光值 A 。分别记为 A 标准管和
A 测定管。
计算公式:
LDL-C 含量(mmol/L)= A 测定管÷A 标准管×C 标准管 =5×A 测定管÷A 标准管。
C 标准管:5mmol/L
注意事项:
1、样本切勿反复冻融,最好在取血后 12 小时内完成测定。
2、配置好的试剂三 4℃保存可半个月。
3、线性范围为 0.17mmol/L- 4.2mmol/L。