测定意义：
果胶是植物细胞壁主要组成成分之一，分为水溶性果胶和不溶性果胶，即原果胶。因其具有良好的乳化、增稠和凝胶作用，在食品、纺织、印染、烟草、冶金等领域具有较广泛的应用。
测定原理：
原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶，并进一步转化为半乳糖醛酸，产物在强酸中与咔唑缩合生成紫红色化合物，在 530 nm 处有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品：
天平、研钵、常温离心机、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、浓硫酸和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液一：液体100mL×2瓶，4℃保存。
提取液二：液体100mL×1瓶，4℃保存。
标准品：液体1mL×1支，4℃保存。
试剂一：浓硫酸，自备。
试剂二：液体2mL×1支，4℃保存。
试剂三：液体3mL×1瓶，4℃避光保存。
样品处理：
将组织样品捣碎，按照样品质量(g)和提取液一体积(mL)为 1: 20 的比列（建议取约 0.05g 样品，加入 1mL提取液一），置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min ，取出冷却后于 5000g 、 25℃离心 10min ，去掉上清，沉淀中再加入 1mL 提取液一重复操作一次，离心后去上清，沉淀中加入 1mL 提取液二，置于 90℃恒温水浴锅中水解 1h ，取出冷却后于 8000g 、25℃离心 15min，取上清液待测。
测定操作表：
| 空白管 | 标准管 | 对照管 | 测定管 |
样本(μL） | | | 30 | 30 |
标准品(μL） | | 30 | | |
浓硫酸(μL | 180 | 180 | 180 | 180 |
混匀、90℃放置 10min，取出后冷却 |
试剂二(μL） | | | 30 | |
试剂三(μL） | 30 | 30 | | 30 |
混匀，25℃静置 30min |
蒸馏水(μL） | 90 | 60 | 60 | 60 |
充分混匀，取 200μL 置于微量石英比色皿/96 孔板中，测定 530nm 处吸光值，分别记为 A1 、A2 、A3 和A4。△A1=A2-A1，△A2=A4-A3 |
注意：空白管和标准管只需测定一次。
计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
原果胶含量(mg /g 鲜重)= (C 标准×V 标) ×△A2÷△A1÷(W÷V 样总) = 0.25×△A2÷△A1÷WC 标准：标准品浓度，0.25mg/mL；V 标：反应体系中加入标准品体积，0.02mL； V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g。
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
原果胶含量(mg /g 鲜重)= (C 标准×V 标) ×△A2÷△A1÷(W÷V 样总) =0.25×△A2÷△A1÷WC 标准：标准品浓度，0.25mg/mL；V 标：反应体系中加入标准品体积，0.02mL； V 样总：加入提取液体积，1mL； W：样本鲜重，g。
注意事项：
1、浓硫酸具有强腐蚀性，操作时需特别注意，90℃加热取出后冷却再打开盖子，以防液体飞溅烧伤。
2、若吸光值超过1，可将样本提取液进行适当稀释再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
3、最低检出限为10μg/g。
