测定意义：
果胶裂解酶（EC4.2.2.10）是果胶酶的重要组成部分，是一种能降解植物细胞壁，导致植物组织软化甚至死亡的解聚酶，来源比较广泛，主要来源于微生物，可用于果汁、果酒的澄清，提高水果出汁率，植物病毒的纯化，纸浆的漂白和纺织品的生物精炼，在减少环境污染和降低能源消耗方面具有潜在的应用价值。
测定原理：
果胶裂解酶作用于果胶中的 α-1,4 糖苷键，生成在还原端 C4 和 C5 之间位置具有不饱和键的不饱和寡聚半乳糖醛酸，在 235nm 处有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品：
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿、恒温水浴锅。
试剂的组成和配制：
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体15mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体15mL×1瓶，4℃保存。
酶液提取：
1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1 ：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。10000g ，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000 ：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w ，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000g， 4℃离心 10min，取上清置于冰上待测。
3、培养液：直接测定。
测定操作表：
| 对照管 | 测定管 |
试剂一 (μL） | | 600 |
试剂二(μL） | 600 | |
40℃温育 3min |
酶液(μL） | 100 | 100 |
混匀，40℃反应 30min |
试剂三(μL） | 300 | 300 |
混匀，对照管调零，1mL 石英比色皿测定 235nm 处吸光值 A。 |
酶活性计算公式：
1. 组织中 PL 活性
(1) 按照蛋白浓度计算
酶活性定义：
在 40℃, pH5.5 条件下，每毫克蛋白每分钟分解果胶产生1nmol 不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。PL 活性（nmol/min/mg prot）= A÷ (ε×d）×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T= 64.1×A÷Cpr。
(2) 按照样本质量计算
酶活性定义：
在 40℃, pH5.5 条件下，每毫克蛋白每分钟分解果胶产生1nmol 不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。PL 活性（nmol/min/mg prot）= A÷ (ε×d）×V 反总÷（V 样×Cpr）÷T= 64.1×A÷Cpr。
2、细胞 PL 活性
酶活性定义：
在 40℃, pH5.5 条件下，每 104 个细胞每分钟分解果胶产生 1nmol 不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。PL 活性（nmol/min/104cell）= A÷ (ε×d）×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T= 64.1×A÷细胞数量。
3、培养液 PL 活性
酶活性定义：
在40℃, pH5.5 条件下，每毫升培养液每分钟分解果胶产生1nmol不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位PL 活性（nmol/min/mL）= A÷ (ε×d）×V 反总÷V 样÷T= 64.1×A。Ε：不饱和半乳糖醛酸摩尔消光系数：5200L/mol/cm ；d：比色皿光径，1cm ；V 反总：反应总体积，1mL； V 样：反应体系中样本体积，0.1mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W ，样本质量，g；T：反应时间，30min。
