羟自由基清除能力检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义：
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一，在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。
测定原理：
H2O2/ Fe²+通过Fenton反应产生羟自由基，将邻二氮菲- Fe²+水溶液中 Fe²+氧化为Fe³+，导致536nm吸光度下降，样品对536nm吸光度下降速率的抑制程度，反映了样品清除羟自由基的能力。
自备实验用品：
可见分光光度计、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体50 mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体16mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体8 mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体16mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体9mL×1瓶，4℃保存。
样品的制备：
1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1 ：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清、果汁等液体样品可直接测定。
3、提取物（或者药物）可配制成一定浓度，如5mg/mL。
操作步骤：
1、分光光度计预热30min ，调节波长至536nm，蒸馏水调零。
2、工作液配制：使用之前按照每管试剂一：试剂二：试剂三=300:150:300 (µL）的比例配制，用多少配多少，混匀。
3、在EP管中加入如下试剂
| 空白管 | 对照管 | 测定管 |
工作液(µL） | 750 | 750 | 750 |
混匀，防止局部颜色过浓 |
样品(µL） | | | 150 |
试剂四(µL） | | 150 | 150 |
H2O (µL） | 300 | 150 | |
混匀、37℃保温 60min ，8000g 25℃离心 5min ，吸取1mL于 1mL 玻璃比色皿中测定 536nm处吸光值，空白管、对照管和测定管的吸光值分别记为 A空、A对和 A测。 |
注 意：空白管和对照管只需测定一次。
计算公式：
羟自由基清除率 D% =（A测-A对）÷（A空-A对）×100%
A空、A对、A测：空白管、对照管和测定管的吸光值。
注意事项：
为了比较不同样品羟自由基清除能力，对于同一批样品必须加入等量的样品，血清、组织匀浆、果汁等液体样品加入同样体积，提取物（或者药物）配制成同样浓度。
