总胆固醇(TC)含量检测试剂盒 ; 100T/96S
测定意义：
TC包括游离胆固醇和胆固醇酯。TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。
测定原理：
利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇（FC）和游离脂肪酸（FFA），从而把胆固醇酯转化为FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化，生成△4-胆甾烯酮和 H₂O₂；最后利用过氧化物酶催化 H₂O₂氧化 4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在 500nm 有特征吸收峰，其颜色深浅与TC含量成正比。
自备的仪器和用品：
水浴锅、可调式移液枪、酶标仪、96 孔板。
试剂组成和配置：
试剂一：异丙醇 100mL(自备)；
试剂二：液体20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；
试剂四：液体 40μL×1 瓶，4℃保存。
TC标准品：液体1mL×1支，0.5μmol/mL ，4℃保存。
TC的提取：
1、组织中 TC 的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心10min，取上清，即TC待测液。
2、细胞、细菌中TC的提取：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL 试剂一，超声波破碎 1min（强度20％，超声2s ，停1s），即TC待测液。
3、血清（浆）样品：直接测定。
测定操作：
1、酶标仪预热30min ，调节波长到500 nm。
2、TC 工作液的配制：临用前，吸取约 0.8mL 试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中，充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中，充分混匀，TC 工作液置于 37℃水浴 10min 。用不完的工作液 4℃保存一周。
3、标准管：依次在 96 孔板中加入20μLFC标准液和 180μLTC工作液，混匀，37℃静置3h后于 500nm测定 A标准管。
4、测定管：依次在 96 孔板中加入 20μL FC 待测液和 180μLTC 工作液，混匀，37℃静置 3h 后于 500nm 测定 A 测定管。
5、空白管：依次在 96 孔板中加入 20μL 试剂一和 180μLTC 工作液，混匀，37℃静置 3h 后于 500nm 测定 A测定管。
计算公式：
1、血清(浆)中TC含量计算：
TC(μmol/dL)=C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)×100=50×(A 测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)C标准液：
0.5μmol/mL；100 mL：1dL=100mL。
2、组织中TC含量计算：
(1) 按样本蛋白浓度计算
FC含量(μmol /mg prot)=C标准液×(A 测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr=0.5×(A 测定管-A空白管)÷(A标准管-A空
白管)÷Cpr
(2) 按样本质量计算
TC含量(μmol / g 鲜重)=C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷WC标准液：0.5μmol/mL；样本蛋白浓度，
mg/mL；W：样本质量，g/mL
3、细胞、细菌中TC含量计算：
TC含量 (μmol /10⁴cell)= C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷细菌或细胞(10⁴cell /L)=0.5×(A 测定管-A空白管)
÷(A标准管-A空白管)÷细菌或细胞(10⁴cell /L)C 标准管：0.5μmol/mL。最低检出限为 1nmol/m。
注 意：
1、标准管和空白管只需测定一次。
