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甘油三酯(TG)含量检测试剂盒 ; 100T/96S

甘油三酯(TG)含量检测试剂盒 ; 100T/96S

  • 货号:YJ49571
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:微量法
  • 分类:脂肪酸代谢系列
  • 规格:100T/96S
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ49571 100T/96S ¥978 大量 液体盒装
  • 商品详情

甘油三酯(TG)含量检测试剂盒 ; 100T/96S

测定意义: 

TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

测定原理: 

用异丙醇提取TG ,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成 H₂O₂ ,过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在 505 nm 处有特征吸收峰。

自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

试剂组成和配置:

试剂一:液体 60 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂二:液体 26 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 26 mL×1 瓶,4℃避光保存。

TG的提取:

1、组织中TG的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1 :5~10 的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g ,4℃离心 10min,取上清,即 TG 待测液。

2、细胞、细菌中TG的提取:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,离心后弃上清,加 1mL 试剂一,超声波破碎1min(强度 20%,超声2s ,停1s),8000g ,4℃离心 10min,取上清,即TG待测液。

3、血清(浆)样品:直接测定。

测定操作:

可见分光光度计预热30min ,调节波长到 505 nm。

试剂(μL)

空白管

测定管

样本

 

50

试剂一

50

 

试剂二

475

475

试剂三

475

475

混匀,室温下静置 20min ,于 505 nm波长处读取吸光值,记为 A 空白和 A 测定,△A=A 测定-A 空白。空白管只需测一管。

计算公式:

标准曲线:y = 0.6522x - 0.0199; R2 = 0.9979;x:标准品浓度(mg/mL) y:吸光值差值 ΔA

1、血清(浆)中中甘油三酯含量计算:

     TG 含量(mg/mL)=(ΔA+0.0199)÷0.6522=1.533×(ΔA+0.0199)。

2、组织、细菌或细胞中甘油三酯含量计算:

(1) 按样本蛋白浓度计算

     TG含量(mg/ mg prot)= (ΔA+0.0199)÷0.6522×V 样÷(Cpr×V 样)=1.533×(ΔA+0.0199)÷Cpr

(2) 按样本质量计算

     TG 含量(mg/ g鲜重)= (ΔA+0.0199)÷0.6522×V 样÷(W×V样÷V样总)=1.533× (ΔA+0.0199)÷ WV样:加入样本体积,0.01

     mL;V样总:加入试剂一体积,1 mL;W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL

注 意:

1、试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。

2、最低检出限为 100μg/mL。