植物总酚(Tp)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义:
植物酚类物质具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
测定原理:
在碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在760nm处有特征吸收峰,测760nm处的吸光值,即可得样品总酚含量。
自备实验用品及仪器:
天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:60%乙醇,自备。
试剂一:液体6mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。
总酚提取:
将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.1g ,加入2.5mL提取液,60℃振荡提取2h。10000g, 25℃, 离心10min,取上清,用提取液定容至2.5mL,待测。
测定操作表:
对照管
测定管
样本待测液(μL)
50
试剂一(μL)
250
混匀,25℃静置 2min
试剂二(μL)
H2O(µL)
700
450
混匀,25℃静置10min,对照管调零,1mL比色皿,测定A760。
总酚含量计算公式:
标准曲线:
y= 5.615x+0.0012 ,R²= 0.9994总酚含量(mg/g干重)=(A760-0.0012)÷5.615×V 样÷(V样÷V样总×W) = 0.445×(A760–0.0012)÷WV样总:加入提取液体积,2.5mL;V样:反应中样品体积,0.05mL; W:样品质量,g
注意事项:
1、吸光值大于2,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。
2、试剂一对皮肤有一定的刺激性,请操作时做好防护措施。
3、最低检出限为2.4μg/g。