考马斯亮蓝法蛋白含量检测试剂盒 ; 50T/48S
测定意义：
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：
在酸性溶液中，考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合形成蓝色复合物；该复合物在 620nm 处有最大吸收峰，其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高，适合微量蛋白质分析。
自备仪器和用品：
离心机、分光光度计、石英比色皿、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 30 mL×1 瓶，4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取：
1、液体样品：澄清液体样品可以直接测定。
2、组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：20 的比例（建议称取约 0.05 g 组织，加入 1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水））
冰浴匀浆，8000g ，4℃离心 10min，取上清，即待测液。（动物样品常常需要稀释）。
3、细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为 500~1000 ：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w ，超声3 秒，间隔7秒，总时间 3min）；然后8000g ，4℃ , 离心10min，取上清置于冰上待测。
测定操作：
1、分光光度计预热 30 min，蒸馏水调零。
2、在石英比色皿中加入：
试剂(μL） | 测定管 | 空白管 |
样本 | 500 | |
蒸馏水 | | 500 |
试剂一 | 500 | 500 |
混匀后，测定波长 620 nm 吸光值，△A=A 测定-A 空白。 |
计算公式：
标准曲线：
y = 14.253x - 0.0007R² = 0.9997 x: 蛋白标准品浓度(mg/mL)y:吸光值差值
1、按液体样本体积计算：
Cpr（mg/mL）=(△A+0.0007)÷ 14.253 =0.07×(△A+0.0007)
2、按组织样本质量计算：
Cpr（mg/g）=(△A+0.0007)÷ 14.253×V 总÷W =0.07×(△A+0.0007)÷W
V 总：提取液体积，1 mL; W：样本质量，g。
注 意：
1、空白管只需要测定一次。
