考马斯亮蓝法蛋白含量检测试剂盒 ; 100T/96S
测定意义：
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：
在酸性溶液中，考马斯亮蓝 G-250与蛋白质结合形成蓝色复合物；该复合物在 620nm 处有最大吸收峰，其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高，适合微量蛋白质分析。
自备仪器和用品：
离心机、酶标仪、96孔板、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体11 mL×1 瓶，4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取：
1、液体样品：澄清液体样品可以直接测定。
2、组织样品：按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为1 ：20 的比例（建议称取约 0.05 g 组织，加入1mL提取液(自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水)冰浴匀浆，8000g ，4℃离心10min，取上清，即待测液(动物样品常常需要稀释)。
3、细菌、真菌：按照细胞数量(10⁴个)：提取液体积(mL)为 500~1000：1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液)，冰浴超声波破碎细胞(功率 300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min)；然后8000g，4℃ , 离心10min，取上清置于冰上待测。
测定操作：
1、酶标仪预热 30 min。
2、在96孔板中加入
试剂(μL） | 测定管 | 空白管 |
样本 | 100 | |
蒸馏水 | | 100 |
试剂一 | 100 | 100 |
混匀后，测定波长 620 nm 吸光值，△A=A 测定-A 空白。 |
计算公式：
标准曲线：
y = 7.1265x - 0.0007 R² = 0.9997 x: 蛋白标准品浓度(mg/mL),y:吸光值差值
1、按液体样本体积计算：
Cpr（mg/mL）=(△A+0.0007)÷7.1265 =0.1403×(△A+0.0007)
2、按组织样本质量计算：
Cpr(mg/g)=(△A+0.0007)÷7.1265×V 总÷W =0.1403×(△A+0.0007)÷W
V 总：提取液体积，1 mL; W：样本质量，g。
注 意：
1、空白管只需要测定一次。
