双缩脲法蛋白含量检测试剂盒 ; 100T/96S
测定意义：
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：
强碱性溶液中，双缩脲与 CuSO₄形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为 1~10mg 蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。
自备仪器和用品：
离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、移液器和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。
标准品：液体 1mL×1 瓶，5 mg/mL ，4℃保存。
样品中可溶性蛋白质提取：
1、液体样品：澄清无色液体样品可以直接测定。
2、组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水）冰浴匀浆，8000g ，4℃离心 10min，取上清，即待测液。(动物样品常常需要稀释)。
3、细菌、真菌：按照细胞数量(10⁴个)：提取液体积(mL)为 500~1000 ：1 的比例(建
议 500 万细胞加入1mL 提取液)，冰浴超声波破碎细胞(功率300w ，超声3 秒，间隔7秒，总时间3min)；然后8000g ，4℃ , 离心10min，取上清置于冰上待测。
测定操作：
1、分光光度计/酶标仪预热 30 min ，调节波长到 540 nm，蒸馏水调零。
2、空白管：取 0.5mL EP 管，加入 40μL 蒸馏水，200μL 试剂一，混匀后室温静置 15 min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，540nm 比色，记为 A 空白管。
3、标准管：取 0.5mL EP 管，加入 40μL 标准液，200μL 试剂一，混匀后室温静置 15 min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，540 nm 比色，记为 A 标准管。
4、测定管：取 0.5mL EP 管，加入 40μL 待测液，200μL 试剂一，混匀后室温静置 15 min ，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板，540nm 比色，记为 A 测定管。
注 意：空白管和标准管只需测定一次
样品中蛋白质浓度计算公式：
C待测(mg/mL)= C标准管×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)=5×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)。
注意事项：
1、样品蛋白浓度须在 1～10mg/ml 范围内，低于 1mg/ml 不能用此法，高于 10mg/ml 须做相应稀释。因此测定前用 1～2 个样做预实验，确保蛋白浓度在1～10mg/ml 范围内。
2、待测样品蛋白提取可用生理盐水、双蒸水或不含蛋白的 PBS 提取。该法受硫酸铵、Tris 缓冲液干扰，提取液中应不含这些物质；否则改用 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
