非蛋白质巯基检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义：
生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能，对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。
测定原理：
巯基基团与5,5’- 二硫代-双-硝基苯甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在412nm 处有最大吸收峰。
自备实验用品：
天平、研钵、可见分光光度计、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿、乙醇和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体50 mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体40 mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体2mL×1瓶，4℃避光保存。
样品的制备：
1、按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1 ：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后 8000g ，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清，培养液：取0.1mL样本，加入0.4mL提取液，混匀，室温静置10min, 然后 8000g ，4℃离心10min，
3、取上清，置冰上待测。
操作步骤
1、分光光度计预热30min，调节波长至412nm，双蒸水调零。
2、操作表
在1mL玻璃比色皿中加入如下试剂
| 对照管 | 测定管 |
样品(μL） | 200 | 200 |
试剂一(μL） | 750 | 750 |
试剂二(μL） | | 50 |
乙醇(μL） | 50 | |
混匀，25℃静置10min ， 测定412nm吸光值，ΔA=A测定-A对照。每个测定管设一个对照管。 |
计算公式：
非蛋白巯基标准曲线：y=3.6222 x- 0.0037，R²=1，x为标品浓度，单位μmol/mL，y为吸光度ΔA。
1、 组织：
(1）按样本重量计算
非蛋白巯基含量(μmol/g鲜重）=(ΔA+0.0037)÷3.6222×V样总÷W=0.276×(ΔA+0.0037）÷W
(2）按样本蛋白浓度计算
非蛋白巯基含量(μmol/mg prot)= (ΔA+0.0037)÷3.6222×V样总÷Cpr=0.276×(ΔA+0.0037)÷Cpr
2、血清、培养液：
非蛋白巯基含量(μmol/L)= (ΔA+0.0037)÷3.6222×5×10³=1380×(ΔA+0.0037）V 样总：加入
提取液体积，1mL；W：样品质量，g ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；5：血清，培养液等液体样本稀释倍数；10³： 1mmol/L=10³μmol/ L
注意事项：
最低检出限为10μmol/L。
