植物类黄酮(Flavonoid)检测试剂盒 ; 100管/96样
测定意义:
类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症等作用。
测定原理:
在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在510nm处有特征吸收峰的红色络合物,测定样品提取液在510nm处的吸光值,即可计算样品类黄酮含量。
自备实验用品及仪器:
天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:60%乙醇,自备。
试剂一:液体1mL×1管,4℃保存。
试剂二:液体1mL×1管,4℃保存。
试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。
类黄酮提取:
将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.02g ,加入2mL提取液,60℃振荡提取2h,10000g,25℃, 离心10min,取上清待测。
测定步骤
1、光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至510nm,蒸馏水调零。
2、操作表
类黄酮含量计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 5.02x+0.0007,R²= 0.9996
类黄酮含量(mg/g干重)= (ΔA–0.0007)÷5.02÷(W÷V样总)= 0.398× (ΔA–0.0007)÷W V样总:加入提取液体积,2.5mL;V样:反应中样品体积,0.108mL;W:样品质量,g
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 2.51x+0.0007,R²= 0.9996
类黄酮含量(mg/g干重)= (ΔA–0.0007)÷2.51÷(W÷V样总)= 0.797×(ΔA–0.0007)÷W V样总:加入提取液体积,2mL;V样:反应中样品体积,0.108mL;W:样品质量,g最低检出限为10µg/g。