生物碱含量检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义：
生物碱存在于自然界（主要为植物，但有的也存在于动物）中的一类含氮的碱性有机化合物， 大多数有复杂的环状结构，氮素多包含在环内，有显著的生物活性，是中草药中重要的有效成分之一。
测定原理：
生物碱与溴甲酚绿指示剂反应，生成绿色化合物，在 416nm 处有最大吸收峰。
需自备的仪器和用品：
分光光度计、水浴锅、超声波清洗器、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、80%乙醇、氯仿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体10mL× 1瓶，4℃保存；
试剂二：液体50mL × 1瓶，4℃保存；
试剂三：液体20mL × 1瓶，4℃避光保存；
生物碱的提取：
样本烘干粉碎，过80 目筛。称取约0.1g 样本，加入0.1mL 试剂一，再加入0.9,mL80%乙醇， 充分混匀后转移到EP 管中，超声波提取 60min ， 8000 g，25℃离心 10 min，取上清液待测。另取空EP管，加入 0.1mL 试剂一和 0.9,mL80%乙醇，混匀后作为空白液。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至416nm处。
2、操作表：在EP管中加入如下试剂
试剂名称(µL ）
空白管
测定管
样本
150
空白液
试剂二
750
试剂三
300
混匀，室温静置 5min
氯仿
1500
剧烈振荡混匀，室温静置 40min，吸取下层氯仿层 1mL 于1mL 玻璃比色皿，416nm 处读取吸光值A，ΔA=A测定-A 空白，空白管只要做一管。
生物碱含量计算：
标准条件下测定的回归方程为 y = 3.83x - 0.0005 ，R² = 0.9942；x 为标准品浓度（mg/mL）， y 为 ΔA。
生物碱含量(mg/g 干重)=(ΔA+0.0005)÷3.83×V 样总÷W= 0.261×(ΔA+0.0005) ÷W V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g。
