总抗氧化能力(FRAP法)检测试剂盒 ; 100T/96S
测定意义：
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理：
在酸性环境下，抗氧化物质还原 Fe³+-三吡啶三吖嗪(Fe³+-TPTZ)产生蓝色的 Fe²+-TPTZ的能力反映了总抗氧化能力。
自备实验用品：
恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体120mL×1瓶，使用前预冷。
试剂一：液体20 mL×1瓶，避光保存。
试剂二：液体2 mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体2 mL×1瓶，避光保存。
混合液(现配现用)：将试剂一、试剂二、试剂三按10:1:1的比例混合，使用前37℃预温。
样品的制备：
(1) 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝）4℃ , 5000rpm 离心10min，取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过30 d）后再测定。
(2) 组织样品
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
(3) 细胞样品
按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000 ：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液 ) ,冰浴超声波破碎（功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
1、酶标仪预热30min，调节波长至593nm。
2、操作表
| 空白管 | 测定管 |
样品(µL) | | 10 |
提取液(µL) | 10 | |
混合液(µL) | 190 | 190 |
充分混匀，反应20min，于96孔板，测定593nm吸光值，△A= A测定-A空白 |
总抗氧化能力计算公式：
标准曲线：y=1.2416x + 0.0134R² = 0.9996x:Trolox浓度(μmol/mL)y:吸光值差值△A
单位定义:用从标准曲线上获得的抗氧化剂Trolox的量来表示样本的总抗氧化能力。
(1) 按样本质量计算
总抗氧化能力(μmol Trolox/g鲜重)=(△A-0.0134)÷1.2416×V样÷(V 样÷V 样总×W) =0.8054×(△A-0.0134)÷W
(2) 按样本蛋白浓度计算
总抗氧化能力(μmol Trolox/mg prot)=(△A-0.0134)÷1.2416×V 样÷(V 样÷V 样总×Cpr)=0.8054×(△A-0.0134)÷Cpr
(3) 按细胞计算
总抗氧化能力(μmol Trolox/10⁴cell)=(△A-0.0134)÷1.2416×V样÷(V 样÷V 样总×细胞数量(万个)= 0.8054×(△A-0.0134)÷细胞
数量(万个）
(4) 按液体体积计算
总抗氧化能力(μmol Trolox/mL)=(△A-0.0134)÷1.2416 =0.8054×(△A-0.0134）V样总：加入提取液体积，1mL；V 样：反应中
样品体积，10μL；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL。
注意事项：
1、试剂二对人体有刺激性，请采取适当的防护措施。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴乳胶手套操作。
2、尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
