脂氧合酶(LOX)检测试剂盒 ; 100T/48S
测定意义：
LOX 广泛存在于动植物组织中，催化不饱和脂肪酸氧化反应，导致膜脂过氧化。在生物体的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。
测定原理：
LOX 催化亚油酸氧化，氧化产物在280nm处有特征吸收峰；测定280nm吸光度增加速率，来计算 LOX 活性。
需自备的仪器和用品：
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1支， 4℃保存。
粗酶液提取：
按照组织质量(g)：试剂一体积(mL)为 1 : 5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。16000g ，4℃离心20min，取上清置冰上待测。
测定：
1、分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长到 280 nm，蒸馏水调零。
2、 在试剂三中加入 10mL 试剂二（振荡混匀 1min），在 30℃水浴中预热 10 min 以上。用不完的试剂 4℃保存。
3、对照管：依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 样本和 180μL 试剂二，30℃反应 30min 后，记录 A对照。
4、测定管：依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 样本和 180μL 试剂三，30℃反应 30min 后，记录 A测定。
5、ΔA=A 测定-A 对照。
LOX 活性计算公式：
(1) 按照蛋白浓度计算
活性单位定义：
25℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化0.01个单位为1个酶活单位。
LOX (U/mg prot) =ΔA×V 反总÷(Cpr×V 样)÷T×100= 33.33×ΔA÷Cpr
(2) 按照样本质量计算
活性单位定义：
25℃中每克组织每分钟催化吸光值变化 0.01 个单位为1个酶活单位。
LOX (U/g鲜重) =ΔA×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷T×100= 33.33× ΔA÷WCpr：上清液蛋白浓度，mg/mL ，需另外测定，建议
使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒；V 反总：反应体系总体积，200μL=0.2mL；V 样：加入反应体系中上清液体积，20μL=
0.02mL；W ：样品质量，g；V样总：上清液总体积，1mL；T：反应时间，30min。
