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游离脂肪酸含量(FFA)检测试剂盒 ; 100T/48S

游离脂肪酸含量(FFA)检测试剂盒 ; 100T/48S

  • 货号:YJ49590
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:微量法
  • 分类:脂肪酸代谢系列
  • 规格:100T/48S
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ49590 100T/48S ¥690 大量 液体盒装
  • 商品详情

游离脂肪酸含量(FFA)检测试剂盒 ; 100T/48S

测定意义: 

FFA 既是脂肪水解的产物,又是脂肪合成的底物。FFA 的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关,也可反映食物贮藏中的品质变化。

测定原理: 

在弱酸性条件下,FFA与铜盐反应生成铜皂,在715nm处有特征吸收峰,在一定范围内游离脂肪酸含量与显色程度呈线性关系。

需自备的仪器和用品:

研钵、台式离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。

试剂组成和配制:

试剂一:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体20mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存。

样品中FFA提取:

组织用蒸馏水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,捣碎后按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)加入试剂一,震荡提取3h,8000g,4℃离心 10min,取上清液待测。

测定操作:

1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到715nm。

2、对照管:取上清液 0.4mL,加0.2mL试剂二,充分震荡5min,室温静置5min,取上层 200μL于微量石英比色皿/96孔板,调零。

3、测定管:取上清液0.4mL,加0.2mL试剂三,充分震荡 5min,室温静置5min,取上层 200μL于微量石英比色皿/96孔板,测定吸光值,记为A。

FFA含量计算公式:

a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y=0.0075 x+ 0.0055,R²=0.994

(1) 按样本蛋白浓度计算

      FFA(nmol/mg prot)= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1×Cpr)=133×(A-0.0055)÷Cpr

(2) 按样本质量计算

      FAS(nmol/鲜重) =(A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×W)=133×(A-0.0055)÷WV1:加入样本体积,0.4mL;V2:提取液体

      积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样品质量,g。

b. 使用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y=0.0038 x+ 0.0055,R²=0.994

(1) 按样本蛋白浓度计算

      FFA(nmol/mg prot)=(A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1×Cpr)=266×(A-0.0055) ÷Cpr 

(2) 按样本质量计算

      FFA(nmol/g鲜重)=(A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1÷V2×W)=266×(A-0.0055)÷WV1:加入样本体积,0.4mL;V2:提取液体积,

      1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。

注意事项:

1、蛋白含量不可直接用提取的上清液直接测定,可用蒸馏水或缓冲液或生理盐水选用本公司的 BCA 法蛋白含量测定试剂盒。

2、最低检出限为2nmol/mL。