类胡萝卜素(carotenoid)含量检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义:
类胡萝卜素是一种脂溶性且具有营养特性的化合物,给植物和动物提供天然色素,是重要的抗氧化剂,并有能力转换为必需维生素。类胡萝卜素可预防细胞,组织和基因损毁,增强身体免疫系统,抵御感染,减少癌症风险,保护心脏。
测定原理:
样品通过混合有机溶剂萃取,类胡萝卜素与非类胡萝卜素成分分离,在 448nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、烘箱,100 目筛、三角瓶或烧杯、漏斗,纱布、玻璃试管、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、正己烷。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 100mL×3 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 100mL× 1 瓶。4℃保存。
试剂三:液体 80mL×1 瓶。4℃保存。
试剂四:自备。(正己烷)。
样品处理:
提取:称取 0.5g 样本,加入 1.5mL 试剂一 ,冰浴匀浆,超声破萃取 15min(可改用振荡金属浴),15000g 25 ℃离心5min,取上层液转入 10mL 离心管中,沉淀用 1.5mL 试剂一重复提取 2 次,并将上层液并入上述 10mL离心管中作为提取出的非皂化类胡萝卜素样品。皂化:向上述非皂化类胡萝卜素样品中加入 2mL 试剂二,混匀,25℃室温避光皂化过夜,皂化完成后,加入 3mL 试剂三,混匀后,5000g 25℃离心5min,将上层类胡萝卜素提取相转入 5mL 离心管,用正己烷定容到 5mL,置冰上待测。
测定操作表:
空白管
测定管
样本(μL)
10
1000
正己烷(μL)
于 1mL 玻璃比色皿,迅速测定 450nm 处吸光值 A ,分别记为 A 空白管和 A 测定管,△A=A 测定管-A空白管
注 意:空白管只需测定一次。
计算公式:
类胡萝卜素含量(μg/g 鲜重)= △A×V 样总÷(ε×d)÷W= 31.25×△A÷W
V 样总:提取液总体积,5mL;ε:类胡萝卜素消光系数,0.16;d:比色皿光径,1cm ; W:样本质量,g
注意事项:
1、提取液易挥发,有毒性,操作时做好防护措施。
2、测定必须能迅速,防止挥发造成误差。