土壤脂肪酶(S-LPS)检测试剂盒 ; 100T/96S
测定意义：
LPS 又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS 广泛的存在于各种生物中。
测定原理：
LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算 LPS 活性。
自备的仪器和用品：
研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、可调式移液枪、甲苯 80mL、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 65mL×2 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20min。
试剂三：甲苯 80mL×1 瓶，4℃保存（自备）。
试剂四：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
标准品：液体 10μL×1 瓶，10 µmol/mL 的标准溶液，4℃保存。临用前加入3.168 mL 甲苯，充分溶解。
样本处理：
建议称取约 0.1g 土样，加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆，再用回旋式振荡器振荡提取 15min，4℃ , 4000g 离心 10min，取上清待测。
S-LPS 测定操作：
1、分光光度计/酶标仪预热 30 min ，调节波长到 710 nm，蒸馏水调零。
2、试剂一和试剂二置于 37℃水浴预热30min。
3、在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂。
试剂名称(μL） | 空白管 | 测定管 |
蒸馏水 | 150 | |
样本 | | 50 |
试剂一 | 300 | 300 |
试剂二 | | 100 |
37℃振荡反应 10 min |
试剂三 | 800 | 800 |
37℃振荡反应 10 min 后，8000g ，25℃ , 离心 10min，取上清液。 |
试剂名称(μL） | 空白管 | 测定管 | 标准管 |
上清液 | 400 | 400 | |
标准品 | | | 400 |
试剂四 | 100 | 100 | 100 |
37℃振荡反应 5min 后，静置 5min ，取 200μL 上层液加入微量石英比色皿/96 孔板，于 710nm 处测定吸光值。 |
注 意：空白管和标准管只需测定一次。
S-LPS 活性计算公式：
活性单位定义：
37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成 1μmol 脂肪酸为一个酶活单位。
S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C 标准品×(A测定管-A 空白管)÷(A标准管- A空白管）]×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷T=16×[(A 测定管－A空白管)÷（A标准管- A 空白管）]÷WC 标准品：10 µmol/mL；V 反总：反应总体积，0.8mL；V 样：反应中加入样本体积，0.05mL；V样总：加入提取液体积，1mL； W：样本质量，g；T：催化反应时间，10 min。
