土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义:
S-LAP 是一类能水解肽链 N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP 活性变化与机体某些病理状态密切相关。
测定原理:
S-LAP 分解 L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在 405nm 有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算 S-LAP 活性。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:液体 65mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶, -20℃保存;
S-LAP测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 405nm,蒸馏水调零。
2、在试剂二瓶中加入30mL 试剂一充分溶解(如较难溶解,可 60℃水浴加热约 30min 促进溶解);用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3、操作表。
试剂名称
对照管
测定管
新鲜土样(g)
0.2
试剂一 (μL)
1200
试剂二(μL)
混匀, 37℃振荡反应 1h 后,8000g 4℃离心 10min ,取 1mL 上清液于比色皿中,405nm 处测定吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。