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土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)检测试剂盒 ; 50管/24样

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)检测试剂盒 ; 50管/24样

  • 货号:YJ50254
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:分光光度法
  • 分类:土壤系列
  • 规格:50管/24样
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ50254 50管/24样 ¥862 大量 液体盒装
  • 商品详情

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)检测试剂盒 ; 50管/24样

测定意义: 

S-LAP 是一类能水解肽链 N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP 活性变化与机体某些病理状态密切相关。

测定原理: 

S-LAP 分解 L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在 405nm 有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算 S-LAP 活性。

自备用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂的组成和配制: 

试剂一:液体 65mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶, -20℃保存;

S-LAP测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 405nm,蒸馏水调零。

2、在试剂二瓶中加入30mL 试剂一充分溶解(如较难溶解,可 60℃水浴加热约 30min 促进溶解);用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

3、操作表。

试剂名称

对照管

测定管

新鲜土样(g)

0.2

0.2

试剂一 (μL)

1200

 

试剂二(μL)

 

1200

混匀, 37℃振荡反应 1h 后,8000g 4℃离心 10min ,取 1mL 上清液于比色皿中,405nm 处测定吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

S-LAP 活力单位的计算:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位的定义:
每天每g土样每天生成 1 μmol  对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP (μmol/d /g土样)=ΔA×V 反总÷(ε×d)×10⁶÷W÷T=14.8×ΔA。
V 反总:反应体系总体积,1.2×10-3 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×10³ L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;T:反应时间,1h=1/24d; W:样本质量,0.2g。