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土壤N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(S-NAG)检测试剂盒 ; 50管/24样

土壤N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(S-NAG)检测试剂盒 ; 50管/24样

  • 货号:YJ50257
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:分光光度法
  • 分类:土壤系列
  • 规格:50管/24样
  • 用途:仅供科研使用
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品牌 货号 纯度/规格 价格 库存 包装
源桔生物 YJ50257 50管/24样 ¥747 大量 液体盒装
  • 商品详情
测定意义: 
S-NAG 是溶酶体中的一种酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG 活性变化与机体某些病理状态密切相关。
测定原理: 
S-NAG 分解 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在 400nm 有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算 NAG 活性。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂的组成和配制: 
试剂一:甲苯 5mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×2 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入 6mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体 25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
样品处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50  目筛。
测定步骤:

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.05

0.05

试剂一 (μL)

25

25

 

室温振荡混匀 15min

90℃振荡混匀 15min

试剂二(μL)

400

 

蒸馏水(μL)

 

400

试剂三(μL)

500

500

混混匀, 37℃振荡反应 1h 后,立即 90℃水浴 5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却 10000g 25℃离心 10min,取上清液。

上清液(μL)

500

500

试剂四(μL)

1000

1000

充分混匀,室温静置 2min 后,400nm 处蒸馏水调零,测定吸光值 A ,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

S-NAG 活力计算:
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.00645x -0.0054;x 为标准品浓度(μmol/L),y 为吸光值。
单位的定义:
每天每g土样中产生1μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG 活力(μmol/d/g土样)=(ΔA+0.0054) ÷0.00645×V 反总÷W÷T =68.84×(ΔA+0.0054)T:反应时间,1h=1/24d;
V 反总:反应体系总体积:9.25×10-4 L;W:样本质量,0.05g。