土壤N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶(S-NAG)检测试剂盒 ; 100管/48样
测定意义：
S-NAG 是溶酶体中的一种酸性水解酶，由土壤微生物分泌。S-NAG 活性变化与机体某些病理状态密切相关。
测定原理：
S-NAG 分解 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在 400nm 有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算 NAG 活性。
自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：粉剂×1瓶， -20℃保存；临用前加入 10mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；
试剂三：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：液体 15mL×1 瓶，4℃保存；
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 400nm,蒸馏水调零。
2、加样表
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样（g） | 0.02 | 0.02 |
试剂一 (μL） | 10 | 10 |
| 室温振荡混匀 15min | 90℃振荡混匀 15min |
试剂二(μL） | 130 | |
蒸馏水 | | 130 |
试剂三(μL） | 160 | 160 |
混匀, 37℃振荡反应 1h 后，90℃水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却, 10000g 25℃离心10min，取上清液（在 EP 管或 96 孔板中加入下列试剂） |
上清液(μL） | 70 | 70 |
试剂四(μL） | 130 | 130 |
充分混匀,室温静置 2min 后, 400nm 处测定吸光值 A ，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。 |
S-NAG 活力计算：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.00645x -0.0054；x 为标准品浓度(μmol/L），y 为吸光值。
单位的定义：
每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG 活力(μmol/d/g土样）＝ (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V 反总÷W÷T =55.81×(ΔA+0.0054)
T：反应时间，1h=1/24d; V 反总：反应体系总体积：3×10-4 L；W：样本质量，0.02g。
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y= 0.0043x -0.0054；x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义：
每天每g土样中产生 1μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG 活力(μmol/d/g土样）＝(ΔA+0.0054) ÷0.0043×V 反总÷W÷T =83.72×(ΔA+0.0054)
T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：3×10-4 L；W：样本质量，0.02g。
