土壤碱性木聚糖酶(S-BAX)检测试剂盒 ; 100T/48S
测定意义：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，NEX 一般分离自最适生长 pH 为 6-8 的微生物。
测定原理：
NEX 在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 NEX 活力。
自备的仪器和用品：
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。
试剂组成和配制：
缓冲液：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 3mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
样本处理：
1、分光光度计/酶标仪预热 30min ，调节波长至 540nm。
2、操作表。
| 对照管 | 测定管 |
土样（g） | 0.02 | 0.02 |
缓冲液(μL） | 150 | 100 |
试剂一 (μL） | | 50 |
混匀，50℃震荡反应 30min ，立即 90℃水浴 10min ，8000g ，25℃离心 10min ，取上清 100μL |
试剂二(μL） | 100 | 100 |
混匀，90℃水浴中显色5min ，取 180μL 于微量石英比色皿/96 孔板测定 540nm 处吸光值 A ，分别记为 A 对照管、A 测定管，△A=A 测定管-A 对照管。 |
S-NEX 计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 1.6904x + 0.0058 ，R² = 0.9989
酶活定义：
50℃, pH6.0 条件下，每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-NEX 活力(μmol/d/g土样）= (△A-0.0058）÷ 1.6904×V 反总×10³÷ W÷T÷ 150= 28.4× (△A -0.0058）÷ W
V 反总：反应总体积，0.15mL；T：反应时间，1/48d ；1000 ：1mmol/L =10³μmol/L；150：木糖分子量。
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.8452x + 0.0058 ，R² = 0.9989
酶活定义：
50℃, pH6.0 条件下，每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-NEX 活力(μmol/d/g 土样）= (△A-0.0058)÷ 0.8452×V 反总×10³÷ W÷T÷ 150= 56.8×（A540-0.0058）÷ WT
V 反总：反应总体积，0.15mL；T：反应时间，1/48d ；1000 ：1mmol/L =10³μmol/L；150：木糖分子量。
注意事项：
1、保证震荡反应 30min，使酶与底物充分接触。
2、注意 90℃水浴防止爆开，以免改变反应体系。
