土壤亚硝酸还原酶(S-NiR)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义：
土壤亚硝酸还原酶是反硝化作用中的关键酶之一，参与亚硝酸盐至 NO 的还原反应，它的活性反映了生物降解过程中氮素的转化效率，为氮素转化规律的研究提供一定的依据。
测定原理：
亚硝酸还原酶可将 NO²—还原为 NO ，使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的 NO²—减少，即 540nm处吸光值的变化可反应土壤中亚硝酸还原酶的活性。
需自备的仪器和用品：
天平、可见分光光度计、水浴锅、低温离心机、1mL 玻璃比色皿。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶， 4℃保存。临用前加 10mL 蒸馏水溶解。
试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。（如出现沉淀可以70-80℃加热溶解）
试剂四：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。（如出现沉淀可以70-80℃加热溶解）
试剂五：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。
工作液：临用前根据用量将试剂四和试剂五以 1:1 的比例混合。
样品处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过 30~50目筛。
测定操作表：
| 空白管 | 对照管 | 测定管 |
风干土样（g） | | 0.1 | 0.1 |
蒸馏水(μL） | | 200 | |
试剂一 (μL） | 200 | | 200 |
试剂二(μL） | 200 | 200 | 200 |
混匀后，25℃反应 1h |
试剂三(μL） | 200 | 200 | 200 |
充分震荡 30S ，10000rpm ，4℃, 离心 10min |
上清液(μL） | 500 | 500 | 500 |
工作液(μL） | 1000 | 1000 | 1000 |
充分混匀，用蒸馏水调零，静置 3min 后测定540nm 处各管吸光值，分别记为 A 空白管、A 对照管、A 测定管。 |
注意事项：
1、配制好的工作液 3 天内使用完。
2、若吸光值超过 3，将上清液进行适当的稀释后再加入工作液显色，并在计算公式中乘以稀释倍数。
3、严格控制显色时间，否则会对结果有影响。
4、标准曲线线性范围为 0.03μmol/mL-1.5μmol/mL。
5、A 空白管-（A测定管-A对照管）线性范围为 0.02-3。
