酸性土壤速效磷检测试剂盒 ; 100T/96S
测定意义：
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。
测定原理：
用双酸法提取酸溶性磷和吸附态磷，用钼锑抗比色法测定。
自备实验用品及仪器：
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、震荡仪。
试剂组成和配制：
提取液：液体 105mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 6mL×1 支，4℃保存。
试剂二：粉剂×1支, 4℃避光保存。临用前加2mL蒸馏水溶解。用不完的试剂4℃保存。试剂三：粉剂×3 支，4℃避光保存。临用前加 1mL 蒸馏水溶解。现配现用。
样本处理：
新鲜土样风干，过 30-50目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为 1 ：5~10 的比例（建议称取约 0.1g土样，加入 1mL 提取液），振荡提取 30min ，10000g ，25℃离心 10min，取上清液待测。
测定操作表：
1、取试剂三一支，加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用。
2、显色液的配制（可测 50 个样）：取 EP 管一支，加入 660μL 试剂一，再加入 100μL 试剂二，充分混匀后，再加入 240μL 试剂三，充分混匀待用；配好的显色液应为黄色，若变蓝则为磷污染；显色液必须现配现用；若一次性测不了 50 个样，可按比例缩小各试剂体积积。
3、操作表
| 空白管 | 测定管 |
样本(μL） | | 40 |
提取液(μL） | 40 | |
显色液(μL） | 20 | 20 |
H₂O (μL) | 140 | 140 |
充分混匀，25℃静置 30min |
于微量石英比色皿/96 孔板中，蒸馏水调零，测定 660nm 处吸光值 A，分别记为 A 空白管和 A 测定管， △A=A 测定管-A 空白管。空白管只要做一管。 |
计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：
y =0.1252x-0.0041 ，R² = 0.9957 ，x 为标准品浓度（mg/L），y 为吸光值。
速效磷含量（mg/kg干重）= (△A+0.0041)÷ 0.1252×V 样÷(W×V 样÷V样总）= 7.987× (△A+0.0041)÷W
V 样：样本体积，0.04mL；V 样总：加入提取液体积，1mL ，W：样本质量，约 0.1g
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y =0.0626x-0.0041 ，R² = 0.9957 ，x 为标准品浓度（mg/L），y 为吸光值。速效磷含量（mg/kg 干重)=(△A+0.0041)÷ 0.0626×V 样÷(W×V 样÷V 样总）= 15.97× (△A+0.0041)÷W
V 样：样本体积，0.04mL；V 样总：加入提取液体积，1mL ，W：样本质量，约 0.1g。
注意事项：
1、配好的显色液当天用完，变蓝则不能使用。
2、ΔA 线性范围为：0.01-1.5。
3、标准曲线线性范围为：0.1mg/L-20mg/L。
