土壤几丁质酶检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义：
几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨) ，以及真菌类的细胞壁中，而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解，具有抵御真菌侵染的作用，成为抗真菌病害的研究热点。
测定原理：
几丁质酶水解几丁质产生 N-乙酰氨基葡萄糖，进一步与对二甲氨基苯甲醛产生红色化合物，在 585nm 处有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
自备实验用品及仪器：
天平、水浴锅、离心机、震荡仪、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿，甲苯、蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 4mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 50mL×1 瓶，4℃避光保存。
样本处理：
新鲜土样风干,过 30-50目筛。
测定操作表：
对照管
测定管
土样（g）
0.2
甲苯(μL）
30
混匀，25℃静置 15min
蒸馏水(μL）
200
试剂一 (μL）
混匀，37℃培养 24h
400
4000rpm ，4℃, 离心 10min ，取上清 300μL 于新的 EP 管中
试剂二(μL）
混匀，沸水浴 5min
试剂三(μL）
900
混匀，37℃显色 20min ，取 1mL 于 1mL 玻璃比色皿中，蒸馏水调零，测定 585nm 处吸光值，记为 A 对照管和 A 测定管，ΔA=A 测定管-A 对照管。
计算公式：
标准曲线：
y=5.2714x-0.0007 ，R²=0.9989；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值 ΔA。
酶活性定义：
37℃条件下，每克土壤每天分解几丁质产生 1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。土壤几丁质酶活性(μg/d/g 土样）=(ΔA +0.0007)÷5.2714×V 反总÷W÷T×1000= 598× (ΔA +0.0007）
V 反总：反应体系总体积，0.63mL；W：样本质量，0.2g；T：反应时间，1d ；1000 ：1mg/mL=1000μg/mL。
注意事项：
1、试剂一充分混匀后再使用。
