土壤锰过氧化物酶(S-Mnp)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义:
锰过氧化物酶(EC1.11.1.13 )是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,主要存在于担子菌中,属于木质素降解酶系,能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物,叠氮化合物、DTT,多环芳烃等。
测定原理:
锰过氧化物酶在 Mn2+存在的条件下,将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚,在 465nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、震荡仪、甲苯。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 30mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。
样本处理:
新鲜土样风干,过 30–50目筛。
测定操作表:
对照管
测定管
土样(g)
0.1
甲苯(μL)
50
25℃, 静置 15min
试剂一 (μL)
700
600
试剂二(μL)
100
试剂三(μL)
200
试剂四(μL)
充分混匀,于 30℃震荡反应 3h,于 10000rpm,4℃离心 10min,取 800μL 于 1mL玻璃比色皿,测定465nm 处吸光值,记为 A 对照管和 A 测定管,△A=A 测定管– A 对照管
酶活计算公式:
酶活性定义:
每克土壤每分钟氧化 1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
ε :愈创木酚摩尔消光系数:12100L/mol/cm ;d:比色皿光径,1cm ;V 反总:反应总体积,1mL;W:样本质量,g;T:反应时间,10min