土壤硝态氮检测试剂盒 ; 100T/96S
测定意义：
硝态氮是指硝酸盐中所含有的氮元素，土壤中的有机物分解生成铵盐，被氧化后变为硝态氮。土壤中硝态氮是高等植物吸收氮的主要形式之一，其含量直接关系到作物的产量与品质。
测定原理：
在浓酸条件下，NO³-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量。
自备实验用品及仪器：
蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、振荡仪。
试剂组成和配制：
试剂一：粉剂×2 支，4℃避光保存。临用前根据用量每支加 1mL 浓硫酸充分溶解。
试剂二：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
样本处理：
按照土壤质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1 ：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 新鲜土样，加入 1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，置于振荡仪中振荡提取 1h ，25℃, 10000g 离心 10min，取上清待测。
测定操作表：
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 410nm，蒸馏水调零。
2、操作表（于 EP 管中加入下列试剂）
| 空白管 | 测定管 |
样本(μL） | | 10 |
提取液(μL） | 10 | |
显色液(μL） | 20 | 20 |
充分混匀，25℃静置 30min |
试剂二(μL） | 475 | 475 |
混匀，涡旋振荡，使出现的沉淀充分溶解，转移 200uL 至微量石英比色皿/96 孔板中测定410nm处吸光值 A，△A=A 测定管-A 空白管 |
计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y=0.0156x+0.0073 ，R²=0.9997
NO³— N 含量（mg/kg 鲜重）=(△A-0.0073)÷ 0.0156÷(W÷V 样总)=64.1× (△A-0.0073)÷W
V 样总：加入提取液体积，1mL ，W：样本质量，g
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y=0.0078x+0.0073 ，R²=0.9997
NO³—— N（mg/kg 鲜重）= (△A-0.0073)÷ 0.0078÷(W÷V 样总)=128.2× (△A-0.0073)÷W
V 样总：加入提取液体积，1mL ，W：样本质量，g。
注意事项：
1、硝酸根不为土壤胶体吸附，且易溶于水，很容易在土壤内部移动，所以测定此指标时应注意采样深度一致。
2、土壤经风干或者烘干很容易引起 NO³—— N 的变化，所以最好采用新鲜土壤进行测定，以准确反映该指标含量。
3、试剂一配制好后尽快使用，4℃可保存一周。
4、试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施。
5、最低检出限为 100μg/kg。
