土壤中性蛋白酶(S-NPT)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。
S-NPT 在中性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
测定原理：
中性条件下，S-NPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在680nm 有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备：
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入6ml蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶4℃保存;临用前加入2mL 试剂七,沸水浴加热溶解，然后加入8ml 试剂一，充分混匀备用，用不完的试剂 4℃保存；
试剂四： 粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入40ml蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂 4℃保存；
试剂五：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂六：液体 1.5mL×1 支，0.05mg/ml 标准酪氨酸溶液，4℃保存；
试剂七：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
样品处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过 30~50目筛。
测定操作表：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 680nm，蒸馏水调零。
2、样本测定：
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样（g） | 0.04 | 0.04 |
试剂一 (μL） | | 300 |
试剂三(μL） | 300 | |
混匀后，40℃水浴30min ，振荡 5-6 次，使土样与反应液充分接触 |
试剂二(μL） | 100 | 100 |
混匀，8000g 25℃离心 10min，取上清液 |
| 测定管 | 对照管 | 标准管 |
上清液(μL） | 150 | 150 | |
试剂六(μL） | | | 150 |
试剂四(μL） | 700 | 700 | 700 |
试剂五(μL） | 150 | 150 | 150 |
混匀，40℃水浴 20min ，8000g 25℃离心 10min ，取上清液 1mL ，680nm 下读取各管吸光值 A |
注 意：标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
S-ALPT 活性计算：
单位定义：
每天每 g 土样中产生 1mg 酪氨酸为一个 S-NPT 活力单位。
S-NPT(mg/d/g 土样)=C标准×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管×V反总÷W÷T=24×(A 测定管-A 对照管)÷A标准管
C 标准管：标准管浓度，0.05mg/mL；V 反总：反应体系总体积，0.4mL；T：反应时间，30min=1/48d； W：样本质量，0.04g。
