土壤酸性蛋白酶(S-ACPT)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。
S-ACPT在酸性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
测定原理：
酸性条件下，S-ACPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在 680nm 有特征吸收峰。
所需仪器及设备：
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制：
液体一：1mL×1 支，4℃保存。
液体二：0.5mL×1 支，4℃保存。
试剂一的配制：临用前按液体一：液体二：蒸馏水=140 (μL）：20 (μL）：21（mL）的比例配制，现配现用，如出现白色絮状沉淀则不能用。
试剂二：粉剂×1瓶， 4℃保存；临用前加入 6ml 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶, 4℃保存；临用前加入 2mL 试剂七,沸水浴加热溶解,然后加入 8ml 试剂一,充分混匀备用，用不完的试剂 4℃保存；
试剂四：粉剂×1瓶， 4℃保存；临用前加入 40ml 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃保存；
试剂五：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂六：液体 1.5mL×1 支，0.05mg/ml 标准酪氨酸溶液，4℃保存；
试剂七：液体 5mL×1 支，4℃保存。
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50目筛。
测定操作表：
1、试剂一的配制：见试剂的组成和配制。
2、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 680nm，蒸馏水调零。
3、样本测定：
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样（g） | 0.04 | 0.04 |
试剂一 (μL） | | 300 |
试剂三(μL） | 300 | |
混匀后，40℃水浴30min ，振荡 5-6 次，使土样与反应液充分接触 |
试剂二(μL） | 100 | 100 |
混匀，8000g 25℃离心 10min，取上清液，在 EP 管中加入下列试剂 |
| 测定管 | 对照管 | 标准管 |
上清液(μL） | 150 | 150 | |
试剂六(μL） | | | 150 |
试剂四(μL） | 700 | 700 | 700 |
试剂五(μL） | 150 | 150 | 150 |
混匀，40℃水浴20min ，8000g 25℃离心 10min，取上清液，680nm 下读取各管吸光值 A |
注 意：标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
S-ALPT 活性计算：
单位定义：
每天每 g 土样中产生 1mg 酪氨酸为一个S-ACPT活力单位。
S-ACPT(mg/d/g土样)=C 标准×(A 测定管-A对照管)÷A 标准管×V 反总÷W÷T=24×(A 测定管-A 对照管)÷A标准管
C 标准管：标准管浓度，0.05mg/mL；V 反总：反应体系总体积，0.4mL；T：反应时间，30min=1/48d；W：样本质量，0.04g。
