土壤总磷/有机磷/无机磷含量检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义:
土壤总磷包括有机磷和无机磷,其中无机磷能够直接被植物利用。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷。同时测定土壤总磷、有机磷和无机磷,可以全面反映土壤磷营养状况。
测定原理:
利用钼蓝法定磷。取一份土样,通过浸提法测定土壤无机磷含量;另外取一份土样,经高温灼烧后,土壤有机磷转化为无机磷,测得土壤总磷含量;总磷含量减去无机磷含量,即可计算出有机磷含量。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式水浴锅,分析天平、可调式移液器、550℃高温电炉,1mL 玻璃比色皿、蒸馏水、100 目筛子(可更小)。
试剂组成和配制:
试剂一:液体×1瓶, 4℃保存。临用前用蒸馏水稀释10倍后再用。
试剂二:液体×1瓶, 4℃保存。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前配制,加入20 mL 蒸馏水,充分溶解后加入10 mL 试剂二,混匀。
标准品:液体×1支,20 μ mol/L 无机磷标准品,4℃保存。
土壤不同形态磷提取:
1、无机磷:称取通过 100 目筛子的风干土样 0.1g ,转移到 10 mL 离心管,加入 10mL 试剂一,震荡混匀,然后置于 45℃水浴 1h ,8000g ,25℃离心 10min,取上清液一,用于无机磷含量测定。
2、总磷提取:取通过 100 目筛子的风干土样,550℃灼烧 1h ,冷却后称取约 0.1g ,转移到 10 mL 离心管,加入 10mL 试剂一,震荡混匀,然后置于 45℃水浴 1h ,8000g ,25℃ , 离心 10min,取上清液二,用于总磷含量测定。
测定操作表:
1、分光光度计预热 30 min ,调节波长到 660 nm,蒸馏水调零。
2、打开水浴锅,调节温度到 40℃。
3、空白管:取 EP 管,依次加入 500μL 蒸馏水,500μL 试剂三,混匀后置于 40℃水浴保温 10min,室温冷却 10 min 后于 660 nm测定吸光度,记为 A 空白管。
4、标准管:取 EP 管,依次加入 50μL 标准液,450μL 蒸馏水,500μL 试剂三,混匀后置于 40℃水浴保温 10min,室温冷却 10 min 后于 660 nm测定吸光度, 记为 A 标准管。
5、测定管:取 EP 管,依次加入 50μL 上清液一或者上清液二,450μL 蒸馏水,500μL 试剂三,混匀后置于40℃水浴保温 10min ,室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度,记为 A 测定管
注 意:空白管和标准管只需测定一次。
土壤磷含量计算:
1、土壤无机磷含量(μmol /g)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总÷W =0.2×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
C 标准液:20 μmol/L;W:土壤样品质量,g;V 总:上清液一总体积,10 mL=0.01 L。
2、土壤总磷含量 (μmol /g干重 )=[C 标准液 ×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管 -A 空 白管)]×V 总÷W=0.2×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
C 标准液:20 μmol/L ;V 标准液:50μL=0.05 mL ;W:土壤样品质量,g ;V 总:
上清液二总体积,10 mL=0.01 L。
3、土壤有机磷(μmol /g)=土壤总磷-土壤无机磷。
注意事项:
试剂三配制过程中,可能会产生黑色固体,其不影响结果,注意吸取时不要将黑色固体吸入。