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土壤蔗糖酶(S-SC)检测试剂盒 ; 100管/48样

土壤蔗糖酶(S-SC)检测试剂盒 ; 100管/48样

  • 货号:YJ50336
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:微量法
  • 分类:土壤系列
  • 规格:100管/48样
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ50336 100管/48样 ¥1012 大量 液体盒装
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土壤蔗糖酶(S-SC)检测试剂盒 ; 100管/48样

测定意义: 

S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。

测定原理: 

S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 S-SC 活性成正比。

自备用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:甲苯 1mL×1 瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:液体 7.5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂三:粉剂×1瓶, 4℃保存;临用前每瓶加入 22mL 蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂 4℃保存;

试剂四:液体 22mL×1 瓶,4℃保存。

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50  目筛。

测定步骤和加样表:

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.03

0.03

试剂一 (μL)

5

5

振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴 15min

试剂二(μL)

75

75

试剂三(μL)

220

 

蒸馏水(μL)

 

220

充分混匀,放入 37℃水浴培养 24 小时,10000 g 4℃, 离心 5min,取上清液

上清液(μL)

85

85

试剂四(μL)

215

215

充分混匀,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却,蒸馏水稀释 10 倍(可以吸取 100μL ,加入 900μL 蒸馏水稀释;若吸光度大于 4,可以加大稀释倍数),取 200uL 至微量石英比色皿或 96 孔板中510nm 处读吸光值 A 。计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。

S-SC 活性计算:

a. 微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为 y = 4.9x -0.062;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

单位的定义:

每天每 g 土样中产生 1mg  还原糖定义为一个 S-SC 活力单位。

S-SC 活力(mg/d/g土样)=(ΔA+0.062) ÷4.9×10×V 反总÷W÷T =20.4×(ΔA+0.062)10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V 反总:反应体系总体积:0.3mL;W:样本质量,0.03g。

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为 y = 2.45x -0.062;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

单位的定义:

每天每 g 土样中产生 1mg  还原糖定义为一个 S-SC 活力单位。

S-SC 活力(mg/d/g土样)=(ΔA+0.062) ÷2.45×10×V 反总÷W÷T =40.8×(A+0.062)10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V 反总:反应体系总体积:0.3mL;W:样品质量,0.03g。