土壤硝酸还原酶(S-NR)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义：
S-NR 催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐，是土壤硝态氮还原的关键酶。研究 S-NR 的活性对合理施肥，降低氮素的损失具有重要意义。
测定原理：
S-NR 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO₃ˉ +NADH⁺H⁺ → NO2ˉ +NAD⁺ +H ₂O；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰，可用分光光度法测定。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂二：液体 8mL×1 瓶，-20℃保存。
试剂三：液体 9mL×1 瓶，4℃保存（如出现结晶析出，60℃-90℃水浴溶解后使用）。试剂四：液体 9mL×1 瓶，4℃保存。
试剂五：标准品储备液 1mL ，-20℃保存。
0.1μmol/mL 标准液的配制：用时将试剂五稀释 100 倍，即取 0.1ml 加蒸馏水定容至 10ml。
样品处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过 30~50目筛。
测定操作表：
试剂名称 | 1mL 带盖离心管 |
测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
风干土样（g） | 0.1 | 0.1 | | |
0.1μmol/mL标准液(μL） | | | 100 | |
蒸馏水(μL） | | 375 | | 475 |
试剂一 (μL） | 375 | | 475 | |
试剂二(μL） | 125 | 125 | 125 | 125 |
混匀后，盖盖后 37℃水浴24h ，8000g25℃离心 10min，取上清液 |
上清液(μL） | 400 | 400 | 400 | 400 |
试剂三(μL） | 250 | 250 | 250 | 250 |
试剂四(μL） | 250 | 250 | 250 | 250 |
混匀，25℃显色 20min，4000g，25℃离心 10min ，取 200uL 上清液至微量石英比色皿或 96 孔板中，540nm下读取各管吸光值。标准管和空白管只需测一次。每个测定管设一个对照管 |
注 意 点：务必先做 2 个样本的预测定，少部分土壤由于样本特殊性可能出现测定管小于对照管，请及时与我司技术支持联系，以获得针对样本特殊性的调整测定方法。
S-NR 活性计算：
单位的定义：
每天每 g 土样中产生 1μmol NO₂ˉ 的量为一个 S-NR 活力单位。
S-NR (μmol /d/g 土样）=C 标准×（A 测定管-A 对照管）÷（A 标准管-A 空白管）×V 反总÷W÷T =0.5×（A测定管-A 对照管）÷（A 标准管-A 空白管）C 标准管：标准管浓度，0.1μmol/mL；V 反总：反应体系总体积，0.5mL；T：反应时间，24h； W：样本质量，0.1g。
