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土壤过氧化氢酶(S-CAT)检测试剂盒 ; 100管/48样

土壤过氧化氢酶(S-CAT)检测试剂盒 ; 100管/48样

  • 货号:YJ50340
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:微量法
  • 分类:土壤系列
  • 规格:100管/48样
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ50340 100管/48样 ¥920 大量 液体盒装
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土壤过氧化氢酶(S-CAT)检测试剂盒 ; 100管/48样

测定意义: 

H₂O₂在 240nm下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应 S-CAT活性的高低。

测定原理: 

用弱碱性提取碱溶性磷和吸附态磷,用钼锑抗比色法测定。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体 300μL×1 瓶,4℃保存;临用前加入 29.7mL 蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂 4℃保存;

试剂二: 粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂 4℃保存(如出现结晶析出,60℃-90℃水浴溶解后使用);

试剂三:液体 3mL×1 瓶,4℃保存。

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50目筛。

测定操作表:

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 240nm,蒸馏水调零。

2、测定前务必准备 96 孔 UV 板一块(UV 板不是普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光,不能透过紫外光,检测波长小于 340nm 务必使用UV 板)。

3、加样表

试剂名称

测定管

无基质管

无土管

风干土样(g)

0.03

0.03

 

试剂一 (μL)

260

 

260

蒸馏水(μL)

 

260

 

25℃振荡培养 20min

试剂二(μL)

10

10

10

混匀 8000g ,25℃离心 5min ,取 180uL 上清

试剂三(μL)

20

20

20

混匀, 240nm 处记录各管吸光值 A

注 意:每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做一管。

S-CAT 活性计算:

a.  用微量石英比色皿测定的计算公式如下

单位的定义:

每天每 g 风干土样催化 1μmol H₂O₂降解定义为一个酶活力单位。

计算公式:

S-CAT(μmol/d/g)=[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷(ε×d)×10⁶]÷W÷T=16.5×(A无土管-A 测定管+A 无基质管)V 反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×10⁴L / mol /cm;d:比色皿光径, 1cm; T:反应时间,20 min=1/72d; W:样本质量,0.03g

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

单位的定义:

每天每 g 风干土样催化 1μmol H₂O₂降解定义为一个酶活力单位。

计算公式:

S-CAT(μmol/d/g)=[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷(ε×d)×10⁶]÷W÷T=33×(A无土管-A 测定管+A 无基质管)V 反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×10⁴ L / mol /cm;d:96 孔板光径, 0.5cm;T:反应时间,20 min=1/72d; W:样品质量,0.03g。