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土壤纤维素酶(S-CL)检测试剂盒 ; 100管/48样

土壤纤维素酶(S-CL)检测试剂盒 ; 100管/48样

  • 货号:YJ50342
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:微量法
  • 分类:土壤系列
  • 规格:100管/48样
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ50342 100管/48样 ¥1265 大量 液体盒装
  • 商品详情

土壤纤维素酶(S-CL)检测试剂盒 ; 100管/48样

测定意义: 

S-CL主要来源于土壤微生物,S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。

测定原理: 

采用蒽酮比色法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。

需自备的仪器和用品:

酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96 孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸(不允许快递)和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:甲苯 10mL×1 瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃保存;

试剂三:液体 40mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×1瓶, 4℃保存; 临用前加入 5mL 蒸馏水和 45mL 浓硫酸充分溶解待用。

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50目筛。

测定操作表:

对照管

测定管

风干土样(g)

0.05

0.05

试剂一 (μL)

50

50

振荡混匀 15min

试剂二(μL)

 

90

试剂三(μL)

370

370

蒸馏水(μL)

180

90

37℃振荡反应 3h 后,90℃水浴 15min(盖紧,防止水分散失),冷却后8000g 25℃离心 10min,取上清,得糖化液

糖化液 (μL)

140

140

试剂四 (μL)

260

260

混匀, 90℃水浴 10min(盖紧,防止水分散失),冷却,取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中,测 620nm 下吸光值 A ,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管

S-CL 活力计算:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为 y = 5.018x - 0.0462;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

单位的定义:

每天每 g 土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-CL 活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反总÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)

T:反应时间,3h=1/8d; V 反总:反应体系总体积:0.6mL;W:样本质量,0.05g

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为 y = 2.5090x - 0.0462;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

单位的定义:

每天每 g 土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-CL活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷2.5090×V 反总÷W÷T =38.3×(ΔA+0.0462)

T:反应时间,3h=1/8d; V 反总:反应体系总体积:0.6mL;W:样本质量,0.05g。