土壤多酚氧化酶(S-PPO)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义:
S-PPO主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素,完成土壤芳香族化合物循环,用于土壤环境修复。
测定原理:
S-PPO能够催化邻苯三酚产生有色物质,后者在 430nm 有特征光吸收。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、乙醚 100mL(不允许快递)、蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:粉剂×2 瓶,4℃保存;临用前取一瓶,加入 15mL 蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂 4℃保存一周。
试剂二:液体 12mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:乙醚 50mL×2 瓶,4℃保存;(自备)。
样品处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
测定操作表:
试剂名称 | 测定管 |
风干土样(g) | 0.05 |
试剂一 (μL) | 500 |
振荡混匀,30℃恒温培养 1 h |
试剂二(μL) | 200 |
试剂三(μL) | 1750 |
振荡数次,室温静置 30min,用蒸馏水调零,取 1mL 上层液于 430nm 处测定吸光值 A。 |
注 意:
1、因乙醚粘度小,易掉液,吸取前需先将枪头在上层液里润洗 2~3 次,再转移测定;
2、乙醚易挥发,转移到比色皿后立即测定,最好一个一个测定。
S-PPO 活力计算:
标准条件下测定的回归方程为 y = 8.97x -0.003 ;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值 A。
单位的定义:
每天每 g 土样中产生 1mg紫色没食子素定义为一个酶活力单位。
S-PPO 活力(mg/d /g土样)=(A+0.003) ÷8.97×V 反总÷W÷T=131×(A+0.003)
T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积 2.45mL;W:样本质量,0.05g。