土壤脲酶(S-UE)检测试剂盒 ; 100管/48样
测定意义：
S-UE能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
测定原理：
利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH₃-N。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：甲苯 2mL×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：粉剂×1瓶， 临用前加入 9mL 蒸馏水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的试剂 4℃保存；
试剂三：液体 22mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：A 液：液体×1支， 4℃保存；试剂四 B 液：液体×1瓶， 4℃保存；临用前将 A 液倒入 B 液中混合，待用；用不完的试剂 4℃保存一周；
试剂五：液体 2mL×1 瓶，4℃保存。
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50目筛。
测定操作表：
1、培养。
2、将培养结束的上清液稀释 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸馏水）。
3、测氨量（在微量石英比色皿或 96 孔板中加入下列试剂）
| 测定管 | 对照管 |
风干土样(g) | 0.05 | 0.05 |
试剂一 (μL） | 20 | 20 |
振荡混匀，室温放置 15min |
试剂二(μL） | 90 | |
蒸馏水(μL） | | 90 |
试剂三(μL） | 190 | 190 |
混匀，放入 37℃水浴培养 24h 后，10000g 25℃离心 10min，取上清液。 |
| 测定管 | 对照管 |
稀释后的上清液(μL） | 80 | 80 |
试剂四 (μL） | 15 | 15 |
试剂五(μL） | 15 | 15 |
充分混匀，室温放置 20min |
| | |
蒸馏水(μL） | 90 | 90 |
混匀，于 578nm 处，蒸馏水调零，读吸光值 A ，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。 |
计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0915x +0.0373 ；x 为标准品浓度(μg/mL），y 为吸光值 A。
单位的定义：
每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(μg/d/g 土样）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反总÷W÷T =656×(ΔA -0.0373)10：稀释倍数；T：反应时间，1d；V 反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样本质量，0.05g
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.04575x +0.0373 ；x 为标准品浓度(μg/mL），y 为吸光值 A。
单位的定义：
每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(μg/d /g 土样）＝(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V 反总÷W÷T =1312×(ΔA -0.0373)10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样本质量，0.05g。
