水中氨态氮/铵根离子检测试剂盒/48样
测定意义：
铵根离子含量是评价水质是否受到污染的一个重要指标，铵根离子在水中存在时呈游离氨或铵盐的状态，两者组成主要取决于水的PH值。
本试剂盒采用靛酚蓝比色法，即在高PH值环境下，将水中的铵根离子转化成铵盐的存在形式来进行测定。水中铵根离子在强碱性介质中与苯酚和次氯酸钠作用，生成稳定的水溶性染料靛酚蓝，吸光度与铵根离子含量成正比，其在625nm处有特征吸收峰。
试剂盒组成和配制：
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
试剂一 | 粉剂×2瓶 | 4℃保存 | 用前每瓶加入10mL蒸馏水，现配现用。 |
试剂二 | A:液体25mL×1瓶
B:液体μL×1支 | 4℃保存 | 用前向A液中加入250μL的B液，混匀后作为试剂二使用。仍旧4℃保存。 |
试剂三 | 液体5mL×1瓶 | 4℃保存 | |
标准品 | 液体×1支 | 4℃保存 | 若重新做标曲，则用到该试剂。 |
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿(光径1cm)、常温离心机、移液器、蒸馏水、振荡仪。
水中铵根离子的测定：
建议正式实验前选取2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费!
1、样本制备：
水溶液或液体样本，直接进行检测。若溶液浑浊，12000rpm常温离心10min, 取 上清液待测。
2、上机检测：
① 可见分光光度计预热30min, 设置温度在25℃,设定波长为625nm, 蒸馏水调零。
② 所有试剂在使用前均须在室温或25℃水浴锅中温育10min。
③ 在EP管中按照下表依次加入试剂：
试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 |
样本 | 80 | |
蒸馏水 | | 80 |
试剂一 | 400 | 400 |
试剂二 | 400 | 400 |
充分混匀，25℃静置1h。 |
试剂三 | 80 | 80 |
充分混匀,全部液体转移至1mL玻璃比色皿,于625nm处测定吸光值,分别记为A测定管和A空白管,△A=A测定管-A空白管。 |
结果计算：
1、标准曲线方程：
y =2.1236x-0.0086;x 是标准品质量(μg),y是△A。
2、水中 NH4+含量(μg/mL)=[(△A+0.0086)÷2.1236]÷V1=0.471×(△A+0.0086)
3、水中 NH4₄+N含量(μg/mL)=[(△A+0.0086)÷2.1236]÷V1=0.366×(△A+0.0086)÷V1V1---反应体系中加入样本体积，0.08mL;
附：标准曲线制作过程：
1、标准品母液(1mg/ml的氮):
2、把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0,1,2,3,4,5μg/mL 。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
3、按照测定管操作表加样操作，依据结果制作标准曲线。
