水中铵根离子活性检测试剂盒/96样
测定意义：
铵根离子含量是评价水质是否受到污染的一个重要指标，铵根离子在水中存在时呈游离氨或铵盐的状态，两者组成主要取决于水的 PH 值。
本试剂盒采用靛酚蓝比色法，即在高 PH 值环境下，将水中的铵根离子转化成铵盐的存在形式来进行测定。水中铵根离子在强碱性介质中与苯酚和次氯酸钠作用，生成稳定的水溶性染料靛酚蓝，吸光度与铵根离子含量成正比，其在 625nm 处有特征吸收峰。
试剂盒组成和配制：
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
试剂一 | 粉剂×2瓶 | 4℃保存 | 用前每瓶加入5mL蒸馏水现配现用。 |
试剂二 | A:液体10mL×1瓶B:液体μL×1支 | 4℃保存 | 用前向A液中加入100μL的B液混匀后作为试剂二使用仍旧4℃保存。 |
试剂三 | 液体2mL×1支 | 4℃保存 | |
标准品 | 液体×1支 | 4℃保存 | 若重新做标曲，则用到该试剂。 |
所需的仪器和用品：
酶标仪、96孔板、台式离心机、可调式移液枪、研钵、冰和蒸馏水 。
水中铵根离子的测定：
建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费!
1、样本制备：
水溶液或液体样本,直接进行检测。若溶液浑浊，12000rpm常温离心10min，取上清液。
2、上机检测：
① 酶标仪预热30min，设置温度在25℃,设定波长为 625nm。
② 所有试剂在使用前均须在室温或25℃水浴锅中温育10min。
③ 在96孔板中按照下表依次加入试剂：
试剂(μL) | 测定管 | 对照管 |
样本 | 20 | |
蒸馏水 | | 20 |
试剂一 | 100 | 100 |
试剂二 | 100 | 100 |
充分混匀, 25℃静置1h |
试剂三 | 20 | 20 |
充分混匀，于625nm处测定吸光值，分别记为A测定管和A空白管，△A=A测定管-A空白管。 |
结果计算：
1、标准曲线：
y = 4.7044x-0.0063 ；x 是标准品质量(μg），y 是△A。
2、水中NH4+含量(μg/mL)=[(△A+0.0063)÷4.7044]÷V1 =0.22 ×(△A+0.0063)÷V1
3、水中NH4+-N含量(μg/mL)=[(△A+0.0063) ÷4.7044] ÷V1÷ 18×14=0.17× ( △ A+0.0063) ÷V1V1---反应体系中加入样本体积，0.02mL。
附：标准曲线制作过程：
1、标准品母液（1mg/mL 的氮）：
2、把母液稀释成以下浓度梯度的标准品：0, 2,4,6, 8,10 μg/mL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
3、按照测定管操作表加样操作，依据结果制作标准曲线。
