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土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)检测试剂盒 ; 50管/24样

土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)检测试剂盒 ; 50管/24样

  • 货号:YJ50355
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:分光光度法
  • 分类:土壤系列
  • 规格:50管/24样
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ50355 50管/24样 ¥472 大量 液体盒装
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土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)检测试剂盒 ; 50管/24样

测定意义: 

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX 一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。

测定原理: 

ACX 在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算 ACX 活力。

自备实验用品及仪器:

天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅,可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。

试剂组成和配制:

缓冲液:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃避光保存。

样品处理:

新鲜土样风干,过 30-50目筛。

测定操作表:

对照管

测定管

土样(g)

0.1

0.1

缓冲液(μL)

600

400

试剂一 (μL)

 

200

混匀,50℃震荡反应 30min ,立即 90℃水浴 10min,8000g,25℃离心 10min ,取上清 500μL

试剂二(μL)

500

500

混匀,90℃水浴中显色 5min ,1mL 玻璃比色皿,对照管调零,测定 A540。

S-ACX 计算公式:

标准曲线:y = 2.5554x - 0.002 ,R² = 0.9983

酶活定义:

50℃, pH4.8 条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol  还原糖所需的酶量为一个酶活单位。

S-ACX 活力(μmol/d/g土样)=(A540+0.002)÷ 2.5554×V 反总×10³÷ W÷T÷ 150= 75.14×(A540+0.002)÷ W

V 反总:反应总体积,0.6mL;T:反应时间,1/48d ;1000 :1mmol/L =10³μmol/L;150:木糖分子量。

注意事项:

1、保证震荡反应 30min,使酶与底物充分接触。

2、注意 90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。