土壤有效硅检测试剂盒 ; 100T/96S
测定意义:
硅元素是一种十分重要的植物营养元素,土壤中有效硅含量影响着植物的光合作用、呼吸作用以及对逆境的抗性。
测定原理:
硅酸根与钼酸铵在弱酸条件下生成硅钼酸,可被还原剂还原成硅钼蓝,在 700nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、常温离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、震荡仪。
试剂组成和配制:
提取液:液体 105mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 4mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 4mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 4mL 试剂四溶剂充分溶解。
试剂四溶剂:液体 4mL×1 瓶,4℃保存。
样本处理:
新鲜土样风干,过20 目筛,按照土壤质量(g):提取液体积(mL)为 1 :5 的比例(建议称取约 0.2g 土样,加入 1mL 提取液),振荡提取 1h ,10000g ,25℃离心 10min,取上清液待测。
测定操作表:
| 空白管 | 测定管 |
样本(μL) | | 40 |
提取液(μL) | 40 | |
试剂一 (μL) | 40 | 40 |
混匀,35℃, 15min |
试剂二(μL) | 40 | 40 |
混匀,25℃, 10min |
试剂三(μL) | 40 | 40 |
试剂四(μL) | 40 | 40 |
充分混匀,25℃静置 30min |
于微量石英比色皿/96 孔板,蒸馏水调零,测定 700nm 处吸光值 A,分别记为 A 空白管和 A 测定管,△ A=A 测定管-A 空白管 |
计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.0933x -0.0523 ,R² = 0.9992
有效硅含量(mg/kg)= (△A+0.0523)÷ 0.0933×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)= 53.6× (△A+0.0523)÷W
V 反总:反应总体积,0.2mL;V 样:反应体系中加入样本体积,0.04mL;V 样总:加入提取液体积,1mL, W:样本质量,g
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.0467x -0.0523 ,R² = 0.9992
有效硅含量(mg/kg)= (△A+0.0523)÷ 0.0467×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)= 107.2× (△A+0.0523)÷W
V 反总:反应总体积,0.2mL;V 样:反应体系中加入样本体积,0.04mL;V 样总:加入提取液体积,1mL, W:样本质量,g。