土壤植酸酶检测试剂盒 ; 100T/48S
测定意义：
植酸酶（phytase）是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸（盐）的一类酶的总称，属磷酸单酯水解酶，它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷，降低粪便中的磷含量，减轻对环境的污染，改善营养成分的吸收和利用，因此具有极其广泛的研究和应用价值。
测定原理：
植酸酶在一定温度和 pH 值条件下，水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物，无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物，在 700nm 处有特征吸收峰，根据 700nm 处吸光值变化可计算得植酸酶活性。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅，甲苯（不允许快递）。
试剂组成和配制：
缓冲液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶， 4℃避光保存，临用前加缓冲液 30mL 配制，现用现配；用不完的试剂 4℃保存一个月。
试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。
显色剂：粉剂×6 管，4℃避光保存，临用前根据用量每瓶加 0.4mL 双蒸水溶解，再加 1.6mL 试剂二混匀。
样本处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50目筛。
测定操作表：
| 对照管 | 测定管 |
样本（g） | 0.03 | 0.03 |
甲苯 | 20 | 20 |
振荡混匀，室温放置 15min |
缓冲液(µL） | 500 | |
试剂一 (µL） | | 500 |
混匀，37℃孵育 24h ，10000g ，4℃离心 5min，取上清 |
上清 | 100 | 100 |
显色剂(µL） | 100 | 100 |
混匀，静置 15min ，测定 700nm 处吸光值，△A=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。 |
酶活性计算公式：
标准曲线：
y = 0.8795x + 0.0084 ，R² = 0.9977；x 为标准品浓度(μmol/mL），y 为吸光值△A。
酶活性定义：
在 37℃ , pH5.5 的条件下，每克土样每小时从 5mmol/L 的植酸钠溶液中释放出 1μmol 的无机磷为一个酶活力单位。
植酸酶活性(μmol/h /g 土样）= (△A-0.0084）÷0.8795×V 反总÷W÷T=0.82× (△A-0.0084）
V 反总：反应总体积，0.52mL；T：反应时间，24h；W：样本质量，0.03g
注意事项：
1、显色剂需要临用前根据用量配制，每一瓶是10个样本的用量，新配制的显色剂若有颜色则已经污染或者试剂过期，应放弃使用。
2、ΔA 线性范围为 0.01-0.5。
