总抗氧化能力(FRAP法)检测试剂盒 ; 50管/48样
测定意义：
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理：
在酸性环境下，抗氧化物质还原Fe³+-三吡啶三吖嗪(Fe³+-TPTZ)产生蓝色的Fe²+-TPTZ的能力反映了总抗氧化能力。
自备实验用品：
恒温水浴锅、低温离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体60mL×1瓶，使用前预冷。
试剂一：液体50 mL×1瓶，避光保存。
试剂二：液体5 mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体5 mL×1瓶，避光保存。
混合液(现配现用)：将试剂一、试剂二、试剂三按10:1:1的比例混合，使用前37℃预温。
样品的制备：
(1) 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝）4℃, 5000rpm离心10min，取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过30d）后再测定。
(2) 组织样品
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1 ：5~10的比例（建议称取约 0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g ，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
(3) 细胞样品
按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000 ：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎（功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
操作步骤：
1、分光光度计预热30min，调节波长至593nm。
2、操作表
| 测定管 | 对照管 |
样品(µL) | | 50 |
提取液(µL) | 50 | |
混合液(µL) | 950 | 950 |
充分混匀，反应20min，于1mL玻璃比色皿，测定593nm吸光值，△A= A测定-A空白 |
总抗氧化能力计算公式：
标准曲线：y=2.4832x+0.0134 R²=0.9996 x:Trolox浓度(μmol/mL)y:吸光值差值△A
单位定义:用从标准曲线上获得的抗氧化剂Trolox的量来表示样本的总抗氧化能力。
(1) 按样本质量计算
总抗氧化能力(μmol Trolox/g鲜重)=(△A-0.0134)÷2.4832×V 样÷(V 样÷V 样总×W) =0.4027×(△A-0.0134)÷W
(2) 按样本蛋白浓度计算
总抗氧化能力(μmol Trolox/mg prot)=(△A-0.0134)÷2.4832×V 样÷(V 样÷V 样总×Cpr)=0.4027×(△A-0.0134)÷Cpr
(3) 细胞计算
总抗氧化能力(μmol Trolox/10⁴cell)=(△A-0.0134)÷2.4832×V 样÷(V 样÷V 样总×细胞数量（万个）= 0.4027×(△A-0.0134)÷
细胞数量(万个）
(4) 按液体体积计算
总抗氧化能力(μmol Trolox/mL)=(△A-0.0134)÷2.4832 =0.4027×(△A-0.0134）V 样总：加入提取液体积，1mL；V 样：反应
中样品体积，50μL；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL。
注意事项：
1、尽量避免使用在酸性条件下呈红色或接近红色的试剂，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
2、样品中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。
3、若液体样本为碱性，需要用提取液稀释至酸性后再检测。
