β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定原理:
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 ( β-N-Acetylglucosaminidase ,NAG)广泛存在于各种组织器官、体液、红细胞、白细胞及血小板中,是溶酶体中的一种酸性水解酶。底物在NAG 作用下水解,释放出游离的对硝基酚。加入碱性溶液停止反应,并使对硝基酚显色。在 400nm 处测吸光度,可计算酶活力单位。
试剂组成及配制:
试剂一:溶液40ml×1瓶。
试剂二:底物,粉剂×1支。
试剂三:终止剂60ml×2瓶。
试剂四:液体6ml×1瓶。(天冷会有结晶析出,测试前置于 37℃水浴直至透亮)
试剂五:3mmol/L对硝基酚标准贮备液2ml×1瓶。0.6mmol/L对硝基酚标准应用液的配制:3mmol/L对硝基酚标准贮备液作5倍稀释,即3mmol/L对硝基酚 ∶双蒸水=1∶4稀释。底物缓冲液的配制:底物溶解度小,配制底物溶液时,应先用适量试剂一将试剂二粉剂1支调成糊状,再边搅拌边逐渐加试剂一到30ml,混匀至完全溶解(不可加热)。配好后的底物缓冲液为过饱和溶液,如有结晶,可静置或离心后取上清进行检测。用不完的底物缓冲液 4℃可保存两个月以上。
操作步骤:
单位定义及计算:
1、血清浆、尿液样本单位定义及计算
①、单位定义:
每升样品与底物在37℃作用1分钟,水解产生1µmol对硝基酚为1个酶活力单位。
②、计算公式:
测定步骤:
2、组织样本单位定义及计算
每克组织蛋白与底物在37℃作用1分钟,水解产生1µmol对硝基酚为1个酶活力单位。