实验仪器：
试管、微量移液器、旋涡混匀器、37℃水浴箱（气浴箱）、可见分光光度计（505nm）。
适用范围：
本试剂盒可测各种动物血清（浆）、组织以及培养细胞、细胞培养上清液等样本中丙酮酸含量；
测定意义：
丙酮酸是糖无氧代谢的产物，研究工作者将丙酮酸和乳酸一同测定，并用二者的比值推测循环衰竭的严重程度；此外，它还对维生素 B1 缺乏有一定的研究意义，同时作为一种重要的精细化工中间体, 广泛应用于医药、农药、食品等领域, 尤其是作为医药中间体, 具有良好的发展前景。
操作过程：
| 空白管 | 标准管 | 测定管 |
双蒸水(ml) | 0.1 | | |
0.2 mol/ml 丙酮酸标准(ml） | | 0.1 | |
血清(浆)(ml） | | | 0.1 |
试剂二(ml） | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
混匀后，37℃水浴准确反应 10 分钟 |
试剂三(ml） | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
室温放置5分钟，于505nm处，1cm光径，双蒸水调零，测各管吸光度OD值 |
离心管盖上盖，用针在盖上扎一小孔，旋涡混匀器混匀，95℃水浴（或用锅开盖煮沸）40分钟，取出后流水冷却，然后3500～4000转/分，离心10分钟，（3000 转/分以下离心时间需延长，目的使沉淀完全）。取上清*** ，532nm 处，1cm光径，蒸馏水调零，测各管吸光度值。
[注]：a* ：表示所取的样品量、标准品量、无水乙醇的量、试剂一的量，四者均相等。
（a*一般取 0.1-0.2ml）
1、例如样品取 0.1ml 则标准品、无水乙醇、试剂一也取0.1ml，若样品取0.2ml则标准品、无水乙醇及试剂一也取 0.2ml。因吸光度与加样量呈正比曲线，故结果不受影响。
**一般情况下，标准管、空白管及对照管每批只需做1～2只，若样本不存在溶血、脂血现象，则对照管可以不测，用标准空白管来代替对照管。
***吸取上清比色时最好用移液器吸取上清加入比色皿中，尽量避免倾倒，以免沉淀进入比色皿，影响吸光度。
2、参考取样量：血清（浆）取0.1～0.2ml。低密度脂蛋白悬液取0.1～0.2ml。食油取0.03ml。肝组织、心肌、肌肉组织、螺旋藻等，取5％或10%匀浆0.1～0.2ml较好。
3、标准管参考吸光度：当标准品取样量为0.1ml时，则分光光度计测定标准管吸光度减去空白管的吸光度为0.065～0.070（酶标仪测定取200μl读数时为0.045左右）。当标准品取样量为0.2ml时，则标准管吸光度减去空白管的吸光度为 0.130～0.140（酶标仪测定取200μl读数时为0.1左右）。
4、规范操作方法及简便操作方法中，若发现检测样本吸光度太低，可以将水浴时间40 分钟延长至80分钟，但您的同一课题中MDA的检测都必须延长至80分钟，以免造成批间差异。
简便操作方法：
1、混合试剂的配制：
工作液Ⅰ的配制：试剂一：试剂二：试剂三= a* ：3 ：1，用多少配多少，配好后当天
测定工作液Ⅱ的配制：试剂一：试剂二：50%冰醋酸= a* ：3 ：1，用多少配多少，配好后当天测定
[注]: a*表示与样本的取样量相同,单位为毫升(ml)
2、简便操作表
| 空白管 | 标准管 | 测定管 | 对照管** |
10nmol/ml标准品(ml) | | a* | | |
无水乙醇(ml） | a* | | | |
测试样品(ml） | | | a* | a* |
工作液Ⅰ(ml） | 4ml | 4ml | 4ml | |
工作液Ⅱ(ml） | | | | 4ml |
计算公式：
