超微量Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶检测试剂盒/25样
组份
保存
试剂一
液体
20ml×1瓶
20ml×2瓶
4℃保存 6个月
试剂二
4ml×2瓶
4ml×4瓶
试剂三
粉剂
粉剂×6支
粉剂×12支
-20℃保存 6个月
试剂三的配制:用时每支试剂三粉剂加双蒸水1ml,充分溶解。(用不完-20℃以下可保存一周。)
试剂四
5ml×2瓶
5ml×4瓶
试剂五
甲液
7ml×6瓶
7ml×12瓶
乙液
6ml×6瓶
6ml×12瓶
4℃避光保存 6个月
[注]:试剂五乙液在冬天或 4℃长时间保存时可能会出现凝胶状物质,37℃溶解不了,可将其 60左右水浴 10分钟即可完全溶解;甲液、乙液应防止磷污染。
试剂六
80ml×1瓶
80ml×2瓶
室温保存 6个月
试剂七
10mmol/L标准磷贮备液
5ml×1瓶
试剂八
试剂九
粉剂×4支
粉剂×8支
稀释液
0.5ml×4支
0.5ml×8支
试剂九的配制:用时取一支试剂九稀释液加入一支试剂九粉剂中,充分混匀,用不完的4℃保存。
试剂十
1ml×2支
1ml×4支
双蒸水
40ml×1瓶
4℃或室温保存
0.1μmol/ml 标准磷应用液的配制:用时将10mmol/L磷贮备液100倍稀释,即取0.1ml加双蒸水至10ml。
0.02μmol/ml 磷标准液的配制:用时将0.1μmol/ml磷标准液用双蒸水5倍稀释,即取0.1μmol/ml磷标准液1ml加双蒸水4ml。
基质液的配制:按试剂一 ︰试剂二︰试剂三=260︰ 80︰ 80 比例混合。需多少配多少,现用现配。
显色剂的配制:时取一瓶试剂五甲液加入一瓶已预温好试剂五乙液中,充分混匀,需提前 0.5 小
时配制,2~8℃条件下至少可保存 5 天,配好的显色剂的量够做 13 个管子(如果你的样本量很少,所需的显色剂的量较少,那么你可以按试剂五中的甲液︰乙液=7︰6的比例自行配制显色剂,需多少配多少(按比例配制显色剂时要防止磷污染,最好用专用吸嘴)。
对照管
Na+k+-ATPase测定管
Ca2+Mg2+-ATPase测定管
双蒸水(ml)
0.16
0.1
样本(ml)
试剂八(ml)
0.08
试剂九(ml)
试剂十(ml)
0.06
试剂一(ml)
0.26
试剂二(ml)
试剂三(ml)
混匀,37℃准确反应10 分钟,
试剂四(ml)
混匀,3000~4000 转/分离心 10 分钟,取上清定磷
空白管
标准管
Na+k+-ATPase 测定管
0.3
0.02μmol/ml磷标准(ml)
上清液(ml)
试剂五显色剂vml)
1.0
混匀后,室温静置 2 分钟
试剂六(ml)
混匀,室温静置 5 分钟,在 636nm 处,1cm光径,双蒸水调零,测各管吸光度值。