淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定意义：
SBE（EC 2.4.1.18 ）主要存在于植物中，是参与支链淀粉合成的关键酶，测定 SBE 活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
测定原理：
直链淀粉和碘结合后在 660nm 有特征光吸收，SBE 使直链淀粉含量减少，从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值，一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×2支，4℃保存；临用前每支加入1mL蒸馏水，95℃沸水浴充分溶解后备用；用不完的试剂4℃保存；
试剂三：液体25mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：液体5mL×1瓶，4℃保存；
粗酶液提取：
按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为 1 ：5~10 的比例(建议称取约0.1g组织，加入 1mL 提取液)，进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
试剂名称(μL） | 对照管 | 测定管 |
95℃水浴 1min 后灭活的粗酶液 | 250 | |
粗酶液 | | 250 |
试剂一 | 320 | 320 |
试剂二 | 30 | 30 |
混匀，37℃准确保温 20 min ，95℃水浴 5min（盖紧防止水分散失），冷却 |
试剂三 | 500 | 500 |
试剂四 | 40 | 40 |
混匀，室温静置 10min，用蒸馏水调零，660nm 处读取各管吸光值。 |
注 意：
1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液，然后集中进行5min 95℃水浴处理。
2、试剂二如有沉淀，务必沸水浴溶解后使用。
SBE活力单位的计算：
1、按照蛋白浓度计算：
单位的定义：
以波长660nm的吸光度下降百分率表示，每mg蛋白在反应体系中每降低 1％碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性(U/mg prot)=(A对照管-A测定管)/A 对照管÷Cpr×100
2、按照样本鲜重计算：
单位的定义：
以波长660nm的吸光度下降百分率表示，每g组织在反应体系中每降低 1％碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE 活性(U/g鲜重)=(A对照管-A测定管)/A对照管÷(W÷V样总)×100V 样总:提取液总体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，
mg/mL；W：样品质量，g。
