丁酰胆碱酯酶(B-CHE)检测试剂盒 ; 50管/24样
测定原理：
丁酰胆碱酯酶水解丁酰胆碱生成胆碱及乙酸，胆碱可以与巯基显色剂反应生成 TNB 黄色化合物，根据颜色深浅进行比色定量，水解产物胆碱的数量可以反应胆碱酯酶的活力。
试剂组成及配制：
试剂一：标准品，粉剂×3支，4℃保存。
1μmol/ml标准品应用液的配制：取标准品一支加生理盐水10ml混匀，现用现配。
试剂二：底物粉剂×2支，用时每支粉剂加生理盐水20ml，现用现配，配好后4℃保存两周。
试剂三：显色剂贮备液，3ml×1支，4℃保存，用时以生理盐水1︰ 9稀释，配成显色应用液。需多少配多少，也可以一次配成 30ml，避光冷藏。保存期3个月。
试剂四：抑制剂，液体×1支。打开后可以装在空的小塑料瓶内(附空瓶一只)，室温保存。
试剂五：透明剂，液体6ml×1支。室温保存。
生理盐水：60ml×2瓶，室温保存。
操作过程：
1、样本前处理：
组织样本: 准确称取组织重量,按重量(g)：体积(ml)=1：9的比例,加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清，即为10%匀浆上清液;
血清样本：取抗凝全血 1000～1500转/分钟，离心10分钟，取上层血浆。也可测血清，测时将血清(浆)用生理盐水1︰19稀释；
全血样本：取0.1ml抗凝全血加生理盐水至10ml按 1︰99稀释，取a ml(一般取0.1ml)检测，每个样本取样前必须充分混匀。
2、操作步骤：
| 空白管 | 标准管 | 测定管 | 对照管 |
样本(ml） | | | a* | |
1 μmol/ml标准品应用液(ml) | | a* | | |
双蒸水(ml) | a* | | | |
底物缓冲液(ml) | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
显色应用液(ml) | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
混匀，37℃准确反应6分钟 |
抑制剂(ml) | 0.03 | 0.03 | 0.03 | 0.03 |
透明剂(ml) | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
样本(ml) | | | | a* |
混匀，静置15 分钟，波长412nm，0.5㎝光径，双蒸水调零，测定各管吸光度值。 |
注、参考取样量：
①、大鼠血清测试前用生理盐水20倍稀释，参考取样量为30～50μl。
②、10%脑组织匀浆的参考取样量为30～50μl。
③、1︰99稀释后的全血稀释液取0.1ml。
定义及计算公式：
1、组织匀浆中丁酰胆碱酯酶的计算：
定义：每毫克组织蛋白样本在37℃保温6分钟，水解反应体系中1μmol 基质为1 单位。
2、血清中丁酰胆碱酯酶的计算：
定义：每毫升血清样本在37℃保温6分钟，水解反应体系中1μmol基质为1单位。
全血中丁酰胆碱酯酶的计算：
定义：每毫升全血在37℃保温6分钟，水解反应体系中1μmol 基质为1单位。
