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分型巯基(-SH)检测试剂盒/24T

分型巯基(-SH)检测试剂盒/24T

  • 货号:YJ49144
  • 可售卖地:全国
  • 供货:现货供应
  • 保 质 期:半年
  • 品牌:源桔生物
  • 保存温度:2-8℃
  • 检测方法:微板法
  • 分类:氧化与抗氧化系列
  • 规格:24T
  • 用途:仅供科研使用
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源桔生物 YJ49144 24T ¥680 大量 液体盒装
  • 商品详情

分型巯基(-SH)检测试剂盒/24T

测定原理: 

5 ,5 ’-二硫代双,2-硝基苯甲酸(DTNB)与巯基化合物反应时能产生一种黄色化合物,可进行比色定量测定。

试剂的组成与配制: 

试剂一:标准品粉剂,3支,4℃密封保存 6个月。

10mmol/L  标准品贮备液的配制:每次测定前将1支标准品粉剂加1ml试剂三-缓冲液溶解,即为10mmol/L标准品贮备液,4℃密封保存。

500μmol/L的标准应用液的配制:10mmol/L  标准品∶试剂三-缓冲液=1 ∶ 19 即20  倍稀释配成应用液,按所需量现用现配。

试剂二:透明剂,2ml×1瓶,4℃密封保存 12个月

试剂三:缓冲液,20ml×1瓶,4℃密封保存 6个月。

试剂四:显色剂,3ml×1瓶,4℃避光保存 6个月。

工作液一的配制:按透明剂∶缓冲液∶显色剂=1 ∶50∶25 的比例混合,用多少配多少。

工作液二的配制:按透明剂∶缓冲液=1 ∶75的比例混合,用多少配多少。

试剂五:沉淀剂,10ml×1瓶,室温保存6个月。

所需仪器:

单道移液器:可进行单孔的加样工作

多道移液器:可进行 8  或 12  孔的加样工作

酶标仪:用于微量样品比色分析,吸光度值测定

96 孔酶标板:用于比色的孔板(本所赠送)

操作步骤:

1、样本前处理:样本处理详见说明书。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒(考马斯亮蓝法)或者总蛋白定量测试盒(BCA  法)进行蛋白浓度的测定。

2、操作表:

总巯基测定操作表

 

SH空白孔

SH标准孔

SH测定孔

SH对照孔

试剂三(μl)

10

 

 

 

500μmol/L 标准(μl)

 

10

 

 

 SH 待测样本(μl)

 

 

10

10

工作液一 (μl)

150

150

150

 

工作液二(μl)

 

 

 

150

轻轻摇动孔板,静置5分钟,405nm波长,用酶标仪测定各孔吸光度OD值(30分钟内完成比色)

非蛋白巯基测定操作表

 

非蛋白SH空白孔

非蛋白SH标准孔

非蛋白SH测定孔

非蛋白SH对照孔

试剂三(μl)

10

 

 

 

500μmol/L标准(μl)

 

10

 

 

SH待测样本(μl)

 

 

10

10

工作液一 (μl)

150

150

150

 

工作液二(μl)

 

 

 

150

轻轻摇动孔板,静置5分钟,405nm波长,用酶标仪测定各孔吸光度OD值(30分钟内完成比色)

计算公式:

(一)、血清(浆)中巯基计算公式:    


image.png


(二)、组织中巯基计算公式:  


image.png